24小时热门版块排行榜    

查看: 1462  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wenyi2015

银虫 (正式写手)

[交流] 重组蛋白 离子交换 已有7人参与

各位亲 本人纯化小白 最近做离子交换 目的蛋白大肠杆菌表达 pi 6.5 (网上计算值)使用20mm tris8.0 缓冲液上Q柱 目的蛋白几乎都流穿 目前可以过载 请给位帮助分析原因

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wenyi2015

银虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wochong at 2016-07-01 18:06:30
蛋白都流穿了,原因主要是缓冲液pH,超声功率(前提是包涵体哈),标签丢失,未暴露等原因,详细解决方案可见:蛋白纯化常见问题分析解决:http://www.detaibio.com/topics/qin-he-chun-hua-faq.html...

亲 我的蛋白是可溶性表达 上Q柱 上样前ph8.3 上样时降低到8.15 不知道这个降低会不会导致目的蛋白挂不上柱子

发自小木虫IOS客户端
7楼2016-07-02 09:03:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

hc-material

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
柱子没平衡好。上样速度太快,上电泳图。

离子交换层析过程中,蛋白和柱子的结合取决于局部电荷,不是净电荷,所以与pI有关,但不完全取决于pI。可以在现在的缓冲液情况下换DEAE的试试。DEAE的还不吸附,就可以换阳离子的。
2楼2016-06-29 17:56:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wenyi2015

银虫 (正式写手)

15ml柱子 上样流速1.0ml/min 电泳没跑 直接检测活性了……

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-06-29 17:58:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chlorella409

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
Q柱不行换S柱,蛋白表面电荷不是完全由缓冲决定的。
4楼2016-06-30 09:59:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 312求调剂 +6 上岸吧ZJY 2026-03-22 10/500 2026-03-26 17:55 by fmesaito
[考研] 机械学硕310分,数一英一,一志愿211本科双非找调剂信息 +3 @357 2026-03-25 3/150 2026-03-26 16:34 by by.MENG
[考研] 085602 289分求调剂 +8 WWW西西弗斯 2026-03-24 8/400 2026-03-26 16:33 by 不吃魚的貓
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +16 RichLi_ 2026-03-25 16/800 2026-03-26 16:18 by bruceku07
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +6 丹青奶盖 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:04 by anny19840123
[考研] 311求调剂 +4 勇敢的小吴 2026-03-20 4/200 2026-03-25 18:12 by xcjcqu
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 11/550 2026-03-25 16:17 by 87639
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 材料调剂 +6 匹克i 2026-03-23 6/300 2026-03-24 21:09 by greychen00
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
信息提示
请填处理意见