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小花木兰

银虫 (小有名气)

[求助] 甘油菌种保存问题 已有2人参与

请问,15%左右甘油终浓度保存的大肠杆菌,在-75度冰箱放了4年,还那用吗?  我取出来在加了抗生素平板涂板,37度培养,发现仍有菌生长出来。摇瓶也了现有蛋白表达,请问   若放大生产还能不能用呢?    会不会质粒失得严重,或变异变种
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sunny5117

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
活化一下,还是可以用作放大生产的;
质粒丢失一般是在传代过程中,你这只是冻存,不会有大问题
2楼2016-03-18 11:34:12
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小花木兰

银虫 (小有名气)

会不会冻存久了(大于1年以上)  质粒也会失呢,或者在大肠杆菌中质粒会更加不稳定呢,发酵生产会引起蛋白表达量下降?
3楼2016-03-18 14:46:02
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以活化两次,同时菌落PCR检测下,一般没有问题
4楼2016-03-18 18:11:48
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