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小小佐罗2

木虫 (正式写手)

[求助] 乳酸菌的保存

我最近在做乳酸菌的分离和筛选,但是目前菌种保存上就出了很大问题,我分离到的乳酸菌进行MRS斜面固体保存,目前不到2周吧,再去挑菌在液体培养基中扩大培养,1天后发现只有个别菌株生长,其他的菌株根本就不浑浊,我辛辛苦苦筛出来了13个菌株,只有3个浑浊了,很受打击,前面看别人资料说至少可以保存一个月,现在保存还不到2周,搞不明白问题出在那里,请高人指点一下,
注:另外我还用甘油也保存了,保存方法为50%甘油500微升+菌液500微升-80°保存,今天刚拿出来划线了,还不知道结果。
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小小佐罗2

木虫 (正式写手)

刚忘记说了 我斜面保存乳酸菌的MRS固体培养基中没有加碳酸钙,是不是也有影响那
2楼2012-10-06 16:14:53
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huangjixiang

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-06 19:54:45
根据个人经验,使用加碳酸钙0.5%和脱脂奶粉2%的液体MRS保存比较好,生长好后冷藏保存6个月对一般乳酸菌存活率很好。
3楼2012-10-06 18:15:42
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先查一下是不是你的液体培养基出问题了,可以先用MRS固体培养基活化后再接种液体培养基。
4楼2012-10-07 13:40:11
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小小佐罗2

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wgy2007 at 2012-10-07 13:40:11
先查一下是不是你的液体培养基出问题了,可以先用MRS固体培养基活化后再接种液体培养基。

培养基没问题,可以先用MRS固体培养基活化后再接种液体培养基这句话没搞明白
5楼2012-10-07 19:51:46
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小小佐罗2

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by huangjixiang at 2012-10-06 18:15:42
根据个人经验,使用加碳酸钙0.5%和脱脂奶粉2%的液体MRS保存比较好,生长好后冷藏保存6个月对一般乳酸菌存活率很好。

你意思加了碳酸钙0.5%和脱脂奶粉2%的液体培养基后再加入甘油冷冻保存吗?
6楼2012-10-07 19:52:24
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huangjixiang

捐助贵宾 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 小小佐罗2 at 2012-10-07 19:52:24
你意思加了碳酸钙0.5%和脱脂奶粉2%的液体培养基后再加入甘油冷冻保存吗?...

不冷冻,培养好后直接冷藏保存即可
7楼2012-10-08 09:06:09
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yqh1987

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
乳酸菌大多是厌氧的,你可以试试使用穿刺保藏
8楼2012-10-08 16:30:02
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wgy2007

木虫 (小有名气)

先用MRS固体培养基活化的意思是把你在MRS斜面保藏的菌种再传接一次MRS斜面,菌长好后再挑菌接种到液体培养基扩大培养。
9楼2012-10-09 11:20:45
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小小佐罗2

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by wgy2007 at 2012-10-09 11:20:45
先用MRS固体培养基活化的意思是把你在MRS斜面保藏的菌种再传接一次MRS斜面,菌长好后再挑菌接种到液体培养基扩大培养。

谢谢
10楼2012-10-10 10:40:16
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