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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 甘油菌种保存问题
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小花木兰

银虫 (小有名气)

[求助] 甘油菌种保存问题 已有2人参与

请问，15%左右甘油终浓度保存的大肠杆菌，在-75度冰箱放了4年，还那用吗？  我取出来在加了抗生素平板涂板，37度培养，发现仍有菌生长出来。摇瓶也了现有蛋白表达，请问   若放大生产还能不能用呢？    会不会质粒失得严重，或变异变种
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1楼 2016-03-18 10:07:58
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sunny5117

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
活化一下，还是可以用作放大生产的；
质粒丢失一般是在传代过程中，你这只是冻存，不会有大问题
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2楼2016-03-18 11:34:12
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小花木兰

银虫 (小有名气)
会不会冻存久了（大于1年以上）  质粒也会失呢，或者在大肠杆菌中质粒会更加不稳定呢，发酵生产会引起蛋白表达量下降？
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3楼2016-03-18 14:46:02
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卡维斯

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以活化两次，同时菌落PCR检测下，一般没有问题
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4楼2016-03-18 18:11:48
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