24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1397  |  回复: 10

bradyluo

新虫 (小有名气)

[求助] 关于菌种保存

最近筛出一批菌体,要放假了想要保存!
但是用的甘油灭菌后用枪吸不上来,特别绸,而且之前用甘油保存过得菌体再放到培养基里面活化的时候,活化不出来,是不是有什么问题啊?
求各位大神指教!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cqlsf

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-01-14 15:40:45
楼主  甘油和生理盐水1:3   灭菌用
或者甘油+ 2x生理盐水灭菌, 再1:1和菌液混合
生理盐水也可用0.1M PBS   祝顺利
老顽虫是大酱油滴:知新,行知,业精于勤。。。木虫的闺蜜叫木马。。
2楼2013-01-14 14:16:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oldflying

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-01-14 15:40:59
bradyluo: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-01-14 16:09:15
由于纯甘油十分粘稠,很难定量,一般配成终浓度 50% 的水溶液,高压灭菌后室温保存即可。使用时按 50% 甘油:菌液 = 1:1 混合均匀,然后迅速冷冻(可以用液氮)。
保存后活化不出菌种,可能是甘油浓度不够,造成菌种死亡,常用的是终浓度 10-30% 的甘油,多数用20%左右。
一个人的努力和坚持!
3楼2013-01-14 15:24:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2013-01-19 21:26:56
灭菌的甘油一般配成50%或者75%的,100%的甘油是过于黏稠不好吸。和菌液混合至甘油终浓度为15%,-80°C冰箱冻存。
4楼2013-01-14 15:24:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bradyluo

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by oldflying at 2013-01-14 15:24:39
由于纯甘油十分粘稠,很难定量,一般配成终浓度 50% 的水溶液,高压灭菌后室温保存即可。使用时按 50% 甘油:菌液 = 1:1 混合均匀,然后迅速冷冻(可以用液氮)。
保存后活化不出菌种,可能是甘油浓度不够,造成菌种 ...

谢谢。。
5楼2013-01-14 16:09:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
10~30%甘油。

纯甘油的话把细菌腌咸菜了!
环境卫生、微生物学、卫生应急
6楼2013-01-15 00:30:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

独孤绮梦

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+5, 鼓励新虫 2013-01-19 21:27:04
我比较喜欢用高压灭菌的纯甘油,这样保存菌种的时候可以根据不同的需要随时加入到LB或者其它液体培养基中配成保存液。因为纯甘油用蓝枪头很难吸,所以可以把蓝枪头事先用剪刀剪去一小段尖头再灭菌备用就可以啦~~保存菌种通常用20%甘油。注意加入甘油后要混匀,根据菌种不同,可以选择直接放入-80或者先用液氮速冻再放入-80.
7楼2013-01-15 09:03:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wnanfeng

至尊木虫 (小有名气)

直接用甘油保藏,甘油是高渗溶剂,导致菌体失水,导致菌体死亡。保藏用的甘油溶液一般为20%左右,20%指的是终浓度,也就是用斜面保藏,加20%的甘油溶液(或石蜡油),如果液体菌种,只要添加甘油终浓度不要超过20%即可,斜面4℃保藏,液体-18℃没有问题。
心有多大,舞台就有多大
8楼2013-01-15 10:29:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhwen182

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2013-01-19 21:27:12
甘油浓度太高了吧    甘油配成30%或50%,按比例加菌液,终浓度在15%左右就可以了
9楼2013-01-15 12:12:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

丽羽寒梅

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhang8826857: 金币+5, 鼓励新虫 2013-01-19 21:27:19
菌种的保存要用的甘油浓度应为40%,并置于-20度的冰箱中保存即可!
能认识你们是我的荣幸!
10楼2013-01-19 12:26:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bradyluo 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +4 15064154688 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:07 by zrongyan
[考研] 求调剂,一志愿南京航空航天大学 ,080500材料科学与工程学硕 +7 @taotao 2026-04-03 7/350 2026-04-03 15:07 by hypershenger
[考研] 英一数一408,总分284,二战真诚求调剂 +13 12.27 2026-03-30 15/750 2026-04-03 14:41 by 氮气气气
[考研] 085600 295分求调剂 +19 W55j 2026-03-30 23/1150 2026-04-03 09:53 by 千千运气
[考研] 343求调剂085601 +5 要努力学习x 2026-03-29 6/300 2026-04-02 21:18 by 1104338198
[考研] 318求调剂 +3 笃行致远. 2026-03-31 4/200 2026-04-02 15:56 by Jaylen.
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-04-02 3/150 2026-04-02 15:06 by cal0306
[考研] 0832食品科学与工程学硕282调剂 +4 鱼在水中游a 2026-04-02 7/350 2026-04-02 14:12 by baoball
[考研] 272求调剂,接受跨专业调剂! +4 闲鱼卢 2026-03-31 4/200 2026-04-02 11:18 by guyan1000
[考研] 一志愿西安交大材料学硕(英一数二)347,求调剂到高分子/材料相关专业 +7 zju51 2026-03-31 9/450 2026-04-01 19:35 by CFQZAFU
[考研] 0710生物学求调剂! +6 叙述文 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:39 by JourneyLucky
[考研] 考研材料工程351分调剂 +5 整个好的 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:36 by topgun2009
[考研] 【调剂】一志愿厦大生物与医药调剂 +3 Echo虾米 2026-03-31 3/150 2026-04-01 08:40 by JourneyLucky
[考研] 080200学硕,机械工程专业277分,求带走! +4 瓶子PZ 2026-03-31 4/200 2026-03-31 20:16 by vgtyfty
[考研] 江苏苏北高校诚邀调剂同学 +3 zzll406 2026-03-31 3/150 2026-03-31 16:54 by 及时行乐fan
[考研] 0856 335分 +9 cccchenso 2026-03-29 9/450 2026-03-31 16:37 by lishahe
[考研] 吉大生物学326分求调剂 +3 sunnyupup 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:28 by longlotian
[考研] 083000环境科学与工程调剂,总分281 +4 橙子(胜意) 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
[考研] 322求调剂 +10 宋明欣 2026-03-27 10/500 2026-03-30 18:47 by 544594351
[考研] 本科双非材料,跨考一志愿华电085801电气,283求调剂,任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
信息提示
请填处理意见