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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌种保存问题
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aipinying

金虫 (小有名气)

[求助] 菌种保存问题

大家好，我是微生物新手，实验室有一批菌种需要保存，现在它们在固体斜面培养基上零下4℃保存，现在想改成用零下80℃甘油保存，该怎么操作？谢过大家
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勿忘心安、、
1楼 2012-12-03 15:23:11
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

dgm1208

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-10 08:30:42
aipinying: 金币+5 2013-05-23 13:21:53
我们实验室是这样做的，一般都是先把斜面上的菌株进行平板活化，活化之后再液体培养，用于菌株保存的可以多摇一段时间，然后就用甘油保存，关于甘油的终浓度：真菌是20%，其他菌是15%。一般就是先配置40%或者30%的甘油，灭菌后分装到冻存管中，分装的量是冻存管容积的一半，然后加等体积的菌液，这样终浓度就可以达到20%或者15%。希望能够帮助到你···
赞一下(3人) 回复此楼
科研路艰辛···
12楼2012-12-07 09:36:16
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Jakin_Lau

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把邮箱给我，，，我给你传一本电子书，，，上面有些介绍，，
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

aipinying
2楼2012-12-03 15:59:54
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luowen2012

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-10 08:30:49
用甘油保存菌株一般是放在-70℃以下冷冻起来！你要用的时候再平板上多转接几次就行了，刚开始因为菌株上有甘油所以长得较慢是正常的
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爱拼才会赢
15楼2012-12-09 23:20:17
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普通回帖

xj0311

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流！ 2012-12-04 10:55:38
aipinying: 金币+2 2013-05-23 13:22:46
把你的菌摇起来，直至od值为0.5，放入菌种管中，加入甘油使其终浓度为20%就OK了
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3楼2012-12-03 18:03:36
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microxy
引用回帖:
3楼: Originally posted by xj0311 at 2012-12-03 18:03:36
把你的菌摇起来，直至od值为0.5，放入菌种管中，加入甘油使其终浓度为20%就OK了

4楼2012-12-03 22:32:33
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aipinying

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Jakin_Lau at 2012-12-03 15:59:54
把邮箱给我，，，我给你传一本电子书，，，上面有些介绍，，

cuilingjundream@163.com  谢谢
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勿忘心安、、
5楼2012-12-04 19:19:05
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smilewhensad

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-10 08:30:07
aipinying: 金币+3 2013-05-23 13:22:40
将菌活化（在液体或者固体培养基中），收集菌体，加15%甘油悬浮就可以保存在-80℃了
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6楼2012-12-04 20:41:24
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wadecao

禁虫 (正式写手)
★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-10 08:30:12
本帖内容被屏蔽
7楼2012-12-05 21:37:11
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-10 08:30:21
固体斜面培养基保存半年以上，基本全部完蛋。

将细菌复苏，进入对数生长期，然后将菌液离心收集或者从平板上挑取菌苔，放入10-20%甘油水溶液，-80保存，十年没问题。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
8楼2012-12-06 02:12:20
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448935271

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-12-10 08:30:28
挑菌，加LB摇8小时，加入15%的甘油就可以了
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万物皆有毒，只要剂量足
9楼2012-12-06 08:53:43
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筱筱0815

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我是将菌种接种至液体培养基，然后直接冻存于-70冰箱中，效果挺好，可以用一年多，等时间到了再传代。
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秋天
10楼2012-12-06 14:36:41
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