应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr产物电泳分析
141/2返回列表12下一页
查看: 2291  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

黏小神

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr产物电泳分析 已有3人参与

小白一只，最近开始做pcr(筛引物)，能p出来，但是效果感觉不好！如图所示，左边第一个为M,四个引物，每个5个DNA样，大神们能给我指出其中可能存在的问题吗？我自己实在是无法确定哪里的问题！（感觉哪里都有问题)!或者给我说说pcr或凝胶电泳应该注意的细节之类的，不胜感激！

pcr产物电泳分析
2016-03-03.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-03-03 23:25:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
5个模板 有两个彻底没有，不知道你的模板DNA怎么样，是否跑胶检测过；泳道内弥散带，杂带很多，可能引物特异性不太好，也有可能和模板不好有关，扩增的循环数太多，退火温度/模板量可能得调整一下。
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2016-03-04 09:17:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lxkui_sina

金虫 (小有名气)
我判断最大的问题是引物的问题！ 你的模板是基因组DNA吗？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2016-03-03 23:32:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxkui_sina

金虫 (小有名气)
用在线Primer3来设计引物。退火温度尽量高，根据引物Tm值而定。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2016-03-03 23:34:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxkui_sina

金虫 (小有名气)
你这几个引物就别用了，重新设计吧！

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-03-03 23:35:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黏小神

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lxkui_sina at 2016-03-03 23:32:39
我判断最大的问题是引物的问题！ 你的模板是基因组DNA吗？

是的，基因组DNA，植物的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2016-03-03 23:43:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黏小神

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lxkui_sina at 2016-03-03 23:34:54
用在线Primer3来设计引物。退火温度尽量高，根据引物Tm值而定。

引物是从公司买来的，做ISSR

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2016-03-03 23:44:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxkui_sina

金虫 (小有名气)
你要是做这个，我就看不出什么问题了。我还觉得结果挺好！

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-03-03 23:51:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黏小神

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lxkui_sina at 2016-03-03 23:51:37
你要是做这个，我就看不出什么问题了。我还觉得结果挺好！

我是觉得为什么每个引物的一号和五号都没有，也太巧了:-(。另外有的感觉拖带一样，一整条都在亮

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2016-03-03 23:55:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amberblue


发自小木虫Android客户端
9楼2016-03-04 02:28:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天然云翔

铁杆木虫 (正式写手)

水凤琴

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是你扩增的时候，降温太快，还有你的引物选择，是从哪个片段上截取的，从你的条带来看亮度和宽度都不太好，里面的杂质太多了吧
赞一下 回复此楼
浮萍漂泊本无根，天涯浪子君莫问
10楼2016-03-04 09:04:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 黏小神 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭