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自然_法则

银虫 (初入文坛)

[求助] PCR电泳图

图中点样孔3为2000的marker,其余均为PCR25ul体系产物,胶浓度为1%100,染料是bioteke,不知道为什么每个上样孔最后一条带都特别亮(包括marker也是),哪位友友遇到过或有什么建议的帮我分析下,谢谢!!!

PCR08 中间序列12.11.13.jpg
每一个结果都有与之关联的起因我称之为结果论
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回帖置顶 ( 共有1个 )

xiaoxiaojing

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
自然_法则: 金币+2, 博学EPI+1, 有帮助 2012-11-17 00:35:22
原因有多种,1由于胶浓度不均匀。2 电压不稳定,电泳液使用次数过多。3形成的发卡结构。
7楼2012-11-16 22:00:43
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普通回帖

飒飒东风

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

荧光物质(克隆基因)含量大  ,所以比较亮

[ 发自手机版 https://muchong.com/3g ]
和气生财研究也是
2楼2012-11-14 20:46:24
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自然_法则

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 飒飒东风 at 2012-11-14 20:46:24
荧光物质(克隆基因)含量大  ,所以比较亮

但为什么marker也是一样呢 荧光物质 是指的核酸染料吗
每一个结果都有与之关联的起因我称之为结果论
3楼2012-11-15 08:27:32
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YangKang7057

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

很有可能是你的胶污染了,或者是电泳缓冲液用的次数太多导致的核算污染,换新的缓冲液试一下
4楼2012-11-15 08:53:20
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飒飒东风

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

DNA Marker 即标准DNA,当然是DNA了,要不怎么能用来对比确定DNA的分子量呢
2000的marker是2000 1000  750  500 250 100
DNA的长度和条带的位置有关,DNA量和亮度有关。
至于其他原因 本人不知,一样求解释》》》》:tuzi31
和气生财研究也是
5楼2012-11-15 13:14:30
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自然_法则

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by YangKang7057 at 2012-11-15 08:53:20
很有可能是你的胶污染了,或者是电泳缓冲液用的次数太多导致的核算污染,换新的缓冲液试一下

恩 TAE是配制很久了  不过缓冲液我是只用一次就换的
每一个结果都有与之关联的起因我称之为结果论
6楼2012-11-15 14:06:47
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自然_法则

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by xiaoxiaojing at 2012-11-16 22:00:43
原因有多种,1由于胶浓度不均匀。2 电压不稳定,电泳液使用次数过多。3形成的发卡结构。

能请教下 分子量低于2000的一般用多高电压多大电流吗
每一个结果都有与之关联的起因我称之为结果论
8楼2012-11-17 00:36:36
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