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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr产物电泳分析
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黏小神

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr产物电泳分析 已有3人参与

小白一只，最近开始做pcr(筛引物)，能p出来，但是效果感觉不好！如图所示，左边第一个为M,四个引物，每个5个DNA样，大神们能给我指出其中可能存在的问题吗？我自己实在是无法确定哪里的问题！（感觉哪里都有问题)!或者给我说说pcr或凝胶电泳应该注意的细节之类的，不胜感激！

pcr产物电泳分析
2016-03-03.jpg
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1楼 2016-03-03 23:25:34
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hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
5个模板 有两个彻底没有，不知道你的模板DNA怎么样，是否跑胶检测过；泳道内弥散带，杂带很多，可能引物特异性不太好，也有可能和模板不好有关，扩增的循环数太多，退火温度/模板量可能得调整一下。
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11楼2016-03-04 09:17:16
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lxkui_sina

金虫 (小有名气)
我判断最大的问题是引物的问题！ 你的模板是基因组DNA吗？

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2楼2016-03-03 23:32:39
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lxkui_sina

金虫 (小有名气)
用在线Primer3来设计引物。退火温度尽量高，根据引物Tm值而定。

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3楼2016-03-03 23:34:54
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lxkui_sina

金虫 (小有名气)
你这几个引物就别用了，重新设计吧！

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4楼2016-03-03 23:35:47
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