我用PKC1139质粒进行属间接合转移，三个多月了都没有结合子生长不知道是什么问题呀。现在在进行条件摸索和体系建立。
就是孢子过滤洗脱后40℃，45℃，50℃，55℃这几个条件热激10分钟后，28摄氏度震荡培养2.4.6小时后，与生长到OD600=0.4-0.5的大肠杆菌1:1混合以后涂在含有20毫摩尔氯化镁的MS培养基上，放置16.18.20.22小时后涂相应萘啶酮酸和安普霉素，抗生素浓度都是做过敏感性实验的应该没问题，但是一直没有结合子生长，是我操作有问题还是这个质粒在我的菌体里不实用呀做过的小伙伴帮我看一下啦

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