每日一问(融合标签)
融合大标签一般都是在N端,先让标签蛋白表达来促进目的蛋白可溶,那HIS和一些小标签蛋白是放在目的蛋白的N端还是C端,依据是啥?融合在C端如何有“降解带”,只有可能是目的蛋白降解产生,不可能是转录中止,蛋白会比在N端纯一点吗?问了同事同事说,翻译一般从N端开始,蛋白折叠已经开始,如果贸然将N端融合标签可能会导致更多不可溶蛋白,有的人说融合在C端如果表达降解了,你还不知道你的蛋白有没有表达,如果融合在N端至少可以知道蛋白表达了。额,这可咋办?
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融合大标签一般都是在N端,先让标签蛋白表达来促进目的蛋白可溶,那HIS和一些小标签蛋白是放在目的蛋白的N端还是C端,依据是啥?融合在C端如何有“降解带”,只有可能是目的蛋白降解产生,不可能是转录中止,蛋白会比在N端纯一点吗?问了同事同事说,翻译一般从N端开始,蛋白折叠已经开始,如果贸然将N端融合标签可能会导致更多不可溶蛋白,有的人说融合在C端如果表达降解了,你还不知道你的蛋白有没有表达,如果融合在N端至少可以知道蛋白表达了。额,这可咋办?
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表达意外终止
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没有固定的规矩,GST一般放N端,His放N端和C端都可以,