看文献,作者研究一个蛋白对病毒滴度的影响,选择将基因插入到乳糖操纵子模型中,通过IPTG选择性的表达,他为什么不把这段基因直接敲除呢? 返回小木虫查看更多
乳糖操纵子在未诱导的情况下还是有一个较低水平的表达量的
问题描述的有点过于简单,这个基因是原宿主细胞内的基因么?构建乳糖操纵子模型里面是指把该基因克隆至带有乳糖操纵子的载体,转化至宿主细胞,增加表达拷贝数么? 猜测,基因敲除的工作量要远远大于简单的载体转化,所以择优选择了后者。 研究一个蛋白对病毒滴度的影响,敲除基因是通过“有”和“无”之间的对比体现实验结果。原宿主细胞内IPTG诱导的方式是通过该蛋白“多”和“少”的变化来验证实验猜想。两种思路其实都可以获得有效的数据。 并且,如果不是在原宿主原位验证,而是异源表达该蛋白来做验证,那么IPTG诱导控制也可以实现“有”和“无”的对比实验效果,
乳糖操纵子在未诱导的情况下还是有一个较低水平的表达量的
问题描述的有点过于简单,这个基因是原宿主细胞内的基因么?构建乳糖操纵子模型里面是指把该基因克隆至带有乳糖操纵子的载体,转化至宿主细胞,增加表达拷贝数么?
猜测,基因敲除的工作量要远远大于简单的载体转化,所以择优选择了后者。
研究一个蛋白对病毒滴度的影响,敲除基因是通过“有”和“无”之间的对比体现实验结果。原宿主细胞内IPTG诱导的方式是通过该蛋白“多”和“少”的变化来验证实验猜想。两种思路其实都可以获得有效的数据。
并且,如果不是在原宿主原位验证,而是异源表达该蛋白来做验证,那么IPTG诱导控制也可以实现“有”和“无”的对比实验效果,
可以在培养基中加入葡萄糖,抑制lac promoter。