请问重叠延伸PCR怎么构建缺失突变质粒呀，具体怎么做
求问用重叠延伸PCR怎么构缺失突变质粒，打算构缺失42bp的突变质粒，现在已经设计了突变引物，但具体操作不知道该怎么做，新手小白求帮助
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跟做定点突变一样的方法
参考这个试剂盒的说明书：https://www.agilent.com/cs/library/usermanuals/public/200523.pdf
但是不用买他的试剂盒，用自己有的高保真pcr酶就行。
如果做不出来可以考虑在要删除的区域用任意限制性内切酶先切一下（如果有特异性位点的话），会大大提高效率
，