有偿求一位小老师,助我渡劫
我要用与病原菌作用前后的细菌培养上清液,冻干后复溶跑液相,分析差异峰,找出目标肽。现在还没开始跑,就遇到了用0-60%的乙腈线性洗脱可不可行的问题和样品含盐能不能跑液相的问题,因为我也是半桶水,实验室其他人做相关的少,别人也忙帮不到的地方也多,考虑到做这个实验可能还会遇到的问题,所以想找位我在这段时间能够请教的小老师。
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我要用与病原菌作用前后的细菌培养上清液,冻干后复溶跑液相,分析差异峰,找出目标肽。现在还没开始跑,就遇到了用0-60%的乙腈线性洗脱可不可行的问题和样品含盐能不能跑液相的问题,因为我也是半桶水,实验室其他人做相关的少,别人也忙帮不到的地方也多,考虑到做这个实验可能还会遇到的问题,所以想找位我在这段时间能够请教的小老师。
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这个目标肽是什么,是否知道结构,洗脱条件可以根据峰型来调节,同时除盐的问题可以先解决,但是需要知道样品的一些特性,比如PH值对目标物是否有影响,然后采用哪种方法来除盐
你好,谢谢解答。
前期试验后猜测培养上清液中含有抗菌肽,因此结构位置,对比差异峰是为了快一点找到它在哪里。0-60%乙腈线性洗脱是查文献查来的,可是我这里管液相的人说0的时候,只有水压强会很大,弄坏机器,可是我查了查资料,觉得这个好像不会有什么问题。如你所说,先考虑除盐的问题的话,样品中之所以含盐是因为有培养基成分,我用的是安捷伦poroshell HPH-C18反相柱,是不是只要含盐都不行必须得除,然后抗菌肽一般都带正电、具疏水性,过脱盐柱能解决问题吗
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