线性链置换扩增SDA,扩增曲线荧光下降求解释
最近在做SDA,原理如下,聚合酶和切口酶共同作用线性扩增原理如图1,sybr green ii监测反应。
正常情况扩增及背景如图2。
当加入10倍量的不相关其它链后,扩增分别为图3,图4,图3加入序列长度为62,图4加入序列长度为16。
求各位大神解释图3,图4。
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最近在做SDA,原理如下,聚合酶和切口酶共同作用线性扩增原理如图1,sybr green ii监测反应。
正常情况扩增及背景如图2。
当加入10倍量的不相关其它链后,扩增分别为图3,图4,图3加入序列长度为62,图4加入序列长度为16。
求各位大神解释图3,图4。
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系统加入过载的背景核酸后,会干扰蛋白酶和靶标核酸的结合,使反应无法进行或信号失真,
可以尝试加入单链DNA结合蛋白(SSB)以排除多余核酸的干扰