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哎呀呀哼

铁虫 (初入文坛)

[求助] 线性链置换扩增SDA,扩增曲线荧光下降求解释 已有1人参与

最近在做SDA,原理如下,聚合酶和切口酶共同作用线性扩增原理如图1,sybr green ii监测反应。
正常情况扩增及背景如图2。
当加入10倍量的不相关其它链后,扩增分别为图3,图4,图3加入序列长度为62,图4加入序列长度为16。
求各位大神解释图3,图4。

线性链置换扩增SDA,扩增曲线荧光下降求解释


线性链置换扩增SDA,扩增曲线荧光下降求解释-1


线性链置换扩增SDA,扩增曲线荧光下降求解释-2


线性链置换扩增SDA,扩增曲线荧光下降求解释-3


@biostar2009 @wizardfan 发自小木虫Android客户端
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

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感谢参与,应助指数 +1
系统加入过载的背景核酸后,会干扰蛋白酶和靶标核酸的结合,使反应无法进行或信号失真。

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行至水穷处,坐看云起时
2楼2020-09-09 08:01:20
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哎呀呀哼

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2020-09-09 08:01:20
系统加入过载的背景核酸后,会干扰蛋白酶和靶标核酸的结合,使反应无法进行或信号失真。

那请问增大酶用量可以吗,另外请问信号降低是信号失真导致的吗

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3楼2020-09-09 16:52:13
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

可以尝试加入单链DNA结合蛋白(SSB)以排除多余核酸的干扰
行至水穷处,坐看云起时
4楼2020-09-10 17:10:39
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