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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 线性链置换扩增SDA，扩增曲线荧光下降求解释
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哎呀呀哼

铁虫 (初入文坛)

[求助] 线性链置换扩增SDA，扩增曲线荧光下降求解释 已有1人参与

最近在做SDA，原理如下，聚合酶和切口酶共同作用线性扩增原理如图1，sybr green ii监测反应。
正常情况扩增及背景如图2。
当加入10倍量的不相关其它链后，扩增分别为图3，图4，图3加入序列长度为62，图4加入序列长度为16。
求各位大神解释图3，图4。

线性链置换扩增SDA，扩增曲线荧光下降求解释


线性链置换扩增SDA，扩增曲线荧光下降求解释-1


线性链置换扩增SDA，扩增曲线荧光下降求解释-2


线性链置换扩增SDA，扩增曲线荧光下降求解释-3


@biostar2009 @wizardfan 发自小木虫Android客户端
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1楼 2020-09-08 22:16:33
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
系统加入过载的背景核酸后，会干扰蛋白酶和靶标核酸的结合，使反应无法进行或信号失真。
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哎呀呀哼
行至水穷处，坐看云起时
2楼2020-09-09 08:01:20
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哎呀呀哼

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2020-09-09 08:01:20
系统加入过载的背景核酸后，会干扰蛋白酶和靶标核酸的结合，使反应无法进行或信号失真。

那请问增大酶用量可以吗，另外请问信号降低是信号失真导致的吗

发自小木虫Android客户端
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3楼2020-09-09 16:52:13
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

可以尝试加入单链DNA结合蛋白（SSB）以排除多余核酸的干扰
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行至水穷处，坐看云起时
4楼2020-09-10 17:10:39
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