求助蛋白纯化！！蛋白过不下来怎么办呀！
目的蛋白分子量53Kd，等电点5.05，ph7.2-7.4最稳定，我用36-86mmol/l NaH2PO4缓冲液洗脱的！ph调的 7.3 但是都没有条带，是怎么回事啊。上样前的有目的条带！过了柱子就没有！
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不应该结合在柱子上吗，用缓冲液就能洗下来？？？你用什么纯化的啊？
，
如果是6×his标签的，应该要用咪唑才能置换冲洗下来
如果是融合了GST-Tag的，要用谷胱甘肽（GSH）冲洗下来
过离子柱？ 36-86mmol/l NaH2PO4缓冲液，换成36-500mMNaH2PO4缓冲液试试看