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RNA浓度调整一致

作者 dongnong
来源: 小木虫 400 8 举报帖子
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将不同处理方式的样本RNA浓度调整一致,然后进行反转录和荧光定量PCR,不明白的是如果RNA的浓度调整一致,那Ct值应该也是相同的吧,那这样的话,浓度调整一致的意义是什么呢? 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • 学而时习

    浓度一致,表明对照样和处理样的样本数量是一样的,这样才有可比性,保证内参基因的CT值是一样的,但不同处理会影响目的基因的表达,导致CT值出现差异,然后根据公式计算相对表达量

  • Italyhope

    将rna量调整成一样类似于western blot中你上样相同总量的蛋白,但是你感兴趣的蛋白在不同处理下表达量是不一样的。一样的,你的处理如果对目标基因mrna有影响,ct值又怎么会一样呢?

  • 爆炒小木虫

    总量一致,内容物不一致,也就是潜在的模板不一样。所以通过ct值来反应表达量

  • dongnong

    引用回帖:
    4楼: Originally posted by 爆炒小木虫 at 2020-07-15 23:26:15
    总量一致,内容物不一致,也就是潜在的模板不一样。所以通过ct值来反应表达量

    RNA浓度相同,即总量一致,若Ct值是不相同的,那是不是可以理解为相同总量RNA的目的基因的拷贝数不一样。那这样的话,RNA总量一致,拷贝数不相同的情况是由于片段长度不一致吗?可是提取过程是一样的,怎么会导致片段长度不相同呢?刚刚接触这块,请多多指教

  • dongnong

    引用回帖:
    4楼: Originally posted by 爆炒小木虫 at 2020-07-15 23:26:15
    总量一致,内容物不一致,也就是潜在的模板不一样。所以通过ct值来反应表达量

    RNA浓度相同,即总量一致,若Ct值是不相同的,那是不是可以理解为相同总量RNA的目的基因的拷贝数不一样。那这样的话,RNA总量一致,拷贝数不相同的情况是由于片段长度不一致吗?可是提取过程是一样的,怎么会导致片段长度不相同呢?刚刚接触这块,请多多指教

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