pCRISPomyces-2 敲除质粒构建链霉菌
利用pCRISPomyces-2 敲除单个基因，2kb同源臂的设置，是在spacer上下游各设置1kb的同源臂，想问下是紧挨着spacer+PAM上下设置吗，如果这样设置是不是就是只敲除了27bp,还是也可以不紧挨着设置？
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可以不紧挨着设计，链霉菌基因敲除不好做啊
请教下，不挨着空多大都可以吗？有没有大小要求，上下游几kb可以
哎，这位兄台也是做这个嘛?我要耗死在这个上面了。实验室人没做过 我一个小硕单独建体系 我太难了 快毕业了 一个突变体筛不到
太难了！
楼主做出来了嘛？我连上下游各1KB的片段P都P不出来 ，后来就没设同源臂去敲单基因了，到现在没有拿到突变体，不知道能不能毕业 ！慌得一批
咱们做链霉菌的可以交流下，或者建个群我也要耗死了
，
请问各位大神，后来做了链霉菌基因敲除吗，想咨询方法，感激不尽