应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » pCRISPomyces-2 敲除质粒构建链霉菌
91/1返回列表
查看: 2660  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者yuzhiyin将赠送您 10 个金币

yuzhiyin

金虫 (小有名气)

[求助] pCRISPomyces-2 敲除质粒构建链霉菌 已有1人参与

利用pCRISPomyces-2 敲除单个基因，2kb同源臂的设置，是在spacer上下游各设置1kb的同源臂，想问下是紧挨着spacer+PAM上下设置吗，如果这样设置是不是就是只敲除了27bp,还是也可以不紧挨着设置？
回复此楼

» 猜你喜欢
做人事，看天命！
1楼 2020-07-09 08:58:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forhighbio

捐助贵宾 (著名写手)
可以不紧挨着设计，链霉菌基因敲除不好做啊

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2020-07-09 10:50:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuzhiyin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by forhighbio at 2020-07-09 10:50:13
可以不紧挨着设计，链霉菌基因敲除不好做啊

请教下，不挨着空多大都可以吗？有没有大小要求，上下游几kb可以
赞一下 回复此楼
做人事，看天命！
3楼2020-07-09 14:07:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Pioneer X

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yuzhiyin at 2020-07-09 14:07:07
请教下，不挨着空多大都可以吗？有没有大小要求，上下游几kb可以...

同源臂中间的部分是敲除的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2020-08-21 18:05:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jopersen

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by forhighbio at 2020-07-09 10:50:13
可以不紧挨着设计，链霉菌基因敲除不好做啊

哎，这位兄台也是做这个嘛?我要耗死在这个上面了。实验室人没做过  我一个小硕单独建体系  我太难了 快毕业了  一个突变体筛不到  
太难了！
赞一下 回复此楼
5楼2020-10-16 10:55:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jopersen

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主做出来了嘛？我连上下游各1KB的片段P都P不出来 ，后来就没设同源臂去敲单基因了，到现在没有拿到突变体，不知道能不能毕业 ！慌得一批
赞一下 回复此楼
6楼2020-10-16 10:58:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xhl1024

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Jopersen at 2020-10-16 10:55:38
哎，这位兄台也是做这个嘛?我要耗死在这个上面了。实验室人没做过  我一个小硕单独建体系  我太难了 快毕业了  一个突变体筛不到  
太难了！...

咱们做链霉菌的可以交流下，或者建个群我也要耗死了
赞一下 回复此楼
7楼2021-11-04 15:20:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张永婧1991

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xhl1024 at 2021-11-04 15:20:11
咱们做链霉菌的可以交流下，或者建个群我也要耗死了...

请问各位大神，后来做了链霉菌基因敲除吗，想咨询方法，感激不尽
赞一下 回复此楼
8楼2023-05-23 20:03:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虹之间的停留

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Jopersen at 2020-10-16 10:58:31
楼主做出来了嘛？我连上下游各1KB的片段P都P不出来 ，后来就没设同源臂去敲单基因了，到现在没有拿到突变体，不知道能不能毕业 ！慌得一批

请问； 连上下游各1KB的片段P都P不出来-这个问题最后解决了吗？目前也遇到了这个问题
赞一下 回复此楼
9楼2023-07-17 15:20:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuzhiyin 的主题更新
91/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 dheqf6rz6n 2026-06-27 4/200 2026-06-27 20:27 by p8adfxx4ht
[博后之家] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 dheqf6rz6n 2026-06-27 3/150 2026-06-27 20:26 by p8adfxx4ht
[论文投稿] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 dheqf6rz6n 2026-06-27 4/200 2026-06-27 20:26 by p8adfxx4ht
[硕博家园] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 dheqf6rz6n 2026-06-27 5/250 2026-06-27 20:06 by p8adfxx4ht
[硕博家园] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +4 7s8du2bt8y 2026-06-26 8/400 2026-06-27 18:47 by ztgu5ulw9z
[考博] 27年博士招生信息 +5 rvnc 2026-06-26 8/400 2026-06-27 18:32 by rvnc
[考博] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 7s8du2bt8y 2026-06-26 5/250 2026-06-27 17:07 by ztgu5ulw9z
[基金申请] 无聊看看filecode +7 流流伤 2026-06-23 10/500 2026-06-27 16:19 by 北京中袖冉老师
[基金申请] 无聊看看时间戳打发时间 +8 虎鹤双形 2026-06-23 8/400 2026-06-27 15:53 by miaochunhui
[公派出国] 售T0P一区SCI文章，我:8O5.51.O.54,科目齐全,可＋急 +3 7s8du2bt8y 2026-06-26 4/200 2026-06-27 12:47 by 9g0rmhtq5w
[论文投稿] 求推荐期刊，重谢 +4 girlbaby 2026-06-23 4/200 2026-06-26 16:52 by 不打工牛马
[有机交流] 求助！！ 5+3 我啥都没看见 2026-06-24 4/200 2026-06-26 09:35 by 951037019
[微米和纳米] kh550接枝Sio2失败求助 70+3 娃儿方便面 2026-06-20 3/150 2026-06-26 09:23 by 猫鱼不是鱼
[论文投稿] 基于自然哲学类比的风化壳型稀土矿 +4 太一新韵 2026-06-22 16/800 2026-06-25 18:53 by 太一新韵
[文学芳草园] 看《给阿ma的情书》有感 +6 myrtle 2026-06-21 10/500 2026-06-25 17:54 by myrtle
[基金申请] 2026年WR青拔进展 +5 chs564851482 2026-06-24 7/350 2026-06-24 18:15 by chs564851482
[基金申请] 中！中！中！ +10 zhse276 2026-06-22 10/500 2026-06-24 16:48 by zjhzf5201018
[基金申请] 会评什么时候开始？ +3 Vivilian 2026-06-24 4/200 2026-06-24 16:30 by jurkat.1640
[基金申请] 国自然申请五篇代表作大比拼，感觉这个是最重要的 +7 naalan7001 2026-06-22 12/600 2026-06-24 14:02 by naalan7001
[基金申请] 评委有多少概率知道其他专家手中有哪些人的本子？ +6 huitong441 2026-06-22 6/300 2026-06-23 15:45 by 新城子曾
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭