应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » pCRISPomyces-2 敲除质粒构建链霉菌
91/1返回列表
查看: 2775  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者yuzhiyin将赠送您 10 个金币

yuzhiyin

金虫 (小有名气)

[求助] pCRISPomyces-2 敲除质粒构建链霉菌 已有1人参与

利用pCRISPomyces-2 敲除单个基因，2kb同源臂的设置，是在spacer上下游各设置1kb的同源臂，想问下是紧挨着spacer+PAM上下设置吗，如果这样设置是不是就是只敲除了27bp,还是也可以不紧挨着设置？
回复此楼

» 猜你喜欢
做人事，看天命！
1楼 2020-07-09 08:58:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forhighbio

捐助贵宾 (著名写手)
可以不紧挨着设计，链霉菌基因敲除不好做啊

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2020-07-09 10:50:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuzhiyin

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by forhighbio at 2020-07-09 10:50:13
可以不紧挨着设计，链霉菌基因敲除不好做啊

请教下，不挨着空多大都可以吗？有没有大小要求，上下游几kb可以
赞一下 回复此楼
做人事，看天命！
3楼2020-07-09 14:07:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Pioneer X

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yuzhiyin at 2020-07-09 14:07:07
请教下，不挨着空多大都可以吗？有没有大小要求，上下游几kb可以...

同源臂中间的部分是敲除的

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2020-08-21 18:05:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jopersen

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by forhighbio at 2020-07-09 10:50:13
可以不紧挨着设计，链霉菌基因敲除不好做啊

哎，这位兄台也是做这个嘛?我要耗死在这个上面了。实验室人没做过  我一个小硕单独建体系  我太难了 快毕业了  一个突变体筛不到  
太难了！
赞一下 回复此楼
5楼2020-10-16 10:55:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jopersen

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主做出来了嘛？我连上下游各1KB的片段P都P不出来 ，后来就没设同源臂去敲单基因了，到现在没有拿到突变体，不知道能不能毕业 ！慌得一批
赞一下 回复此楼
6楼2020-10-16 10:58:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xhl1024

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Jopersen at 2020-10-16 10:55:38
哎，这位兄台也是做这个嘛?我要耗死在这个上面了。实验室人没做过  我一个小硕单独建体系  我太难了 快毕业了  一个突变体筛不到  
太难了！...

咱们做链霉菌的可以交流下，或者建个群我也要耗死了
赞一下 回复此楼
7楼2021-11-04 15:20:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

张永婧1991

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xhl1024 at 2021-11-04 15:20:11
咱们做链霉菌的可以交流下，或者建个群我也要耗死了...

请问各位大神，后来做了链霉菌基因敲除吗，想咨询方法，感激不尽
赞一下 回复此楼
8楼2023-05-23 20:03:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虹之间的停留

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by Jopersen at 2020-10-16 10:58:31
楼主做出来了嘛？我连上下游各1KB的片段P都P不出来 ，后来就没设同源臂去敲单基因了，到现在没有拿到突变体，不知道能不能毕业 ！慌得一批

请问； 连上下游各1KB的片段P都P不出来-这个问题最后解决了吗？目前也遇到了这个问题
赞一下 回复此楼
9楼2023-07-17 15:20:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuzhiyin 的主题更新
91/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-28 14:36 by winsaint
[基金申请] 基金不中，共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +4 gdd2018 2026-08-28 9/450 2026-08-28 14:22 by jklily
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+5) +12 晴天加油 2026-08-26 13/650 2026-08-28 11:32 by skyjudy
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[职场人生] 学生撞见辅导员送外卖，第二天全班都沉默了 +3 鲸鱼融金_浙江_� 2026-08-22 3/150 2026-08-26 09:01 by zzuzxg
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭