连接载体酶切位点 SnaBI 和NotI连接效率
如题,准备引入 SnaB I 和 Not I 两个酶切位点,并采用takarra的QuickCut限制酶进行酶切,之后连接至ppic9k。
想请问做过的前辈,SnaB I 是平末端,Not I 是粘性末端,连接效率高不?实在不行可否先酶连SnaB I,之后用PCR纯化试剂盒纯化完毕再进行Not I端酶连?
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如题,准备引入 SnaB I 和 Not I 两个酶切位点,并采用takarra的QuickCut限制酶进行酶切,之后连接至ppic9k。
想请问做过的前辈,SnaB I 是平末端,Not I 是粘性末端,连接效率高不?实在不行可否先酶连SnaB I,之后用PCR纯化试剂盒纯化完毕再进行Not I端酶连?
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快来小伙伴答题呀,送金币了
为什么不采用infusion或者Gibson来做 感觉会方便许多 平末端的连接一直都低效率的 用quickligase可能会效率好些
对的 我猜你说的DH5a是某种感受态细胞
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朋友,我们可以换一下质粒吗?我现在需要pPIC9K,谢谢你。
直接加同源臂用无缝克隆做了。