PCR扩增做的好好的，突然扩增不出来了，什么原因？
PCR扩增做的好好的，一直很稳定，突然扩增不出来了，见图片1。后来换了机器，也是扩增不出来。前几天扩增出的也扩不出来了。重新溶解干粉引物也不行，引物有半年了，-20度保存。又把两个样本同时用两种引物做PCR，这种还是扩增不出，另一种引物可以扩增见图2。这两天扩增条带很暗，见图3，条件没有变，不知道什么原因？DNA应该没问题，是什么原因呢？
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京公网安备 11010802022153号
应该是引物的问题，衰减的可能性比较大
这种情况下就需要做个阳性控制看看。
原因几种可能，逐个排除：
1、酶，酶保存温度是不是低温-20？这个跟酶的质量有关。
2、引物，如果重新溶都没问题就可以排除了
3、试剂buffer。有些试剂会析出，你查看下是不是浓度已经变化了，如果排除上面的问题就重新配制试试，
有可能是dna的问题，或者是pcr程序问题
我也经常做这个，好像没出现过这样的问题，我没出来结果要么是基因没提取出来，要么是试剂问题