| 查看: 3249 | 回复: 5 | ||
| 本帖产生 1 个 博学EPI ，点击这里进行查看 | ||
philoqi新虫 (小有名气)
|
[求助]
PCR扩增做的好好的，突然扩增不出来了，什么原因？
|
|
PCR扩增做的好好的，一直很稳定，突然扩增不出来了，见图片1。后来换了机器，也是扩增不出来。前几天扩增出的也扩不出来了。重新溶解干粉引物也不行，引物有半年了，-20度保存。又把两个样本同时用两种引物做PCR，这种还是扩增不出，另一种引物可以扩增见图2。这两天扩增条带很暗，见图3，条件没有变，不知道什么原因？DNA应该没问题，是什么原因呢？ QQ图片1.jpg  图片2.png  图片3.png |
回复此楼» 猜你喜欢
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有17人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有8人回复
-
导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！
已经有7人回复
-
青基如何破局
已经有7人回复
-
基金不中，共勉
已经有10人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有11人回复
-
基金未中，这种答复是模板吗？
已经有6人回复
-
看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉……
已经有6人回复
-
怎么看青基中了没有啊
已经有5人回复
-
梦想
已经有3人回复
bbqlhb
木虫 (小有名气)
- 博学EPI: 10
- 应助: 70 (初中生)
- 金币: 1818.6
- 红花: 11
- 帖子: 267
- 在线: 127.3小时
- 虫号: 3365870
- 注册: 2014-08-14
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
philoqi: 金币+50, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2016-02-19 15:33:31
philoqi: 金币+50, 博学EPI+1, ★★★很有帮助 2016-02-19 15:33:31
|
这种情况下就需要做个阳性控制看看。 原因几种可能，逐个排除： 1、酶，酶保存温度是不是低温-20？这个跟酶的质量有关。 2、引物，如果重新溶都没问题就可以排除了 3、试剂buffer。有些试剂会析出，你查看下是不是浓度已经变化了，如果排除上面的问题就重新配制试试。 |
3楼2016-02-07 12:16:23
2楼2016-01-31 18:57:14
philoqi
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2257.7
- 散金: 330
- 帖子: 211
- 在线: 21.9小时
- 虫号: 3268569
- 注册: 2014-06-11
- 专业: 临床微生物学检验
4楼2016-02-07 18:52:30
西玛芝瓜
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 445.1
- 散金: 150
- 帖子: 96
- 在线: 32小时
- 虫号: 3477328
- 注册: 2014-10-15
- 性别: MM
- 专业: 化学生物学与生物有机化学
5楼2016-02-09 08:01:36
6楼2016-02-09 19:47:51
投票:
10