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大肠杆菌破壁时为什么要加入buffer

作者 kaka1045
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破壁时要用冰浴?如果细胞破碎仪带有冷冻功能是不是就不用冰浴了?破壁时加入buffer的作用是什么?一般buffer是指什么物质? 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • zhangbighui

    破壁时冰浴是防止蛋白变性沉淀或起泡沫外溢。带有冷冻功能也需要冰浴,超声破碎时温度会升高。buffer起PH缓冲作用,buffer主要为缓冲盐类加一些咪唑或是尿素。

  • kaka1045

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by zhangbighui at 2013-09-03 10:27:08
    破壁时冰浴是防止蛋白变性沉淀或起泡沫外溢。带有冷冻功能也需要冰浴,超声破碎时温度会升高。buffer起PH缓冲作用,buffer主要为缓冲盐类加一些咪唑或是尿素。

    是说大肠里面会有一些酸性活碱性物质?破壁后会使蛋白变性吗

  • wmwnyxt

    因为超生破碎时,温度较高,防止细胞内蛋白质、酶的变性或是胞内代谢产物分解。
    buffer指的是缓冲盐,一般可以选择Tris-HCl或PBS。
    用其目的自语菌体细胞中的很多时酶类等蛋白类物质,需要在一定的盐离子浓度,一定的pH范围内才稳定,
    因此若想得到胞内的活性物质,一般加入缓冲液。

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