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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于SDS-PAGE胶——越往下跑，带越窄
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fendouzi

禁虫 (小有名气)
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1楼 2013-07-19 15:38:18
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fendouzi: 金币+2, ★有帮助 2013-07-22 10:42:55
可能是样品里盐浓度高。
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2楼2013-07-20 02:34:33
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myprayer

专家顾问 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 热心斑斑！ 2013-07-20 12:07:27
fendouzi: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-07-22 10:42:33
哑铃形条带 出现的情况以及弥补措施：
1 上样体积过大导致不完全堆积
使用恰当的上样体积，如果样品过稀，使用超滤浓缩。

2 电泳过程中电场不均匀
如果蛋白浓度已知，上样时确保对称。

3分离胶表面不平
在制胶时使分离胶表面水平。

4 凝胶过期
在指定的失效期前使用凝胶。
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3楼2013-07-20 11:01:34
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myprayer

专家顾问 (著名写手)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 热心斑斑！ 2013-07-20 12:07:51
带越来越窄可能存在的问题以及弥补措施：

1上样过量或者样品中盐浓度过高
降低蛋白上样量通过透析或凝胶过滤降低样品中的盐浓度

2样品沉淀
加大样品中SDS的浓度
3样品中的污染，如脂类或DNA 复合物
离心或过滤样品以除去特定污染

4制胶不佳
确保灌胶均匀，一次完成
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4楼2013-07-20 11:05:39
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