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关于氧化亚铁硫杆菌的浓缩问题,谢谢!

作者 nimbleman
来源: 小木虫 350 7 举报帖子
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我们先培养1L的菌液,然后过滤,老师让我们拿滤液离心4000r/min,10min,取沉淀拿pH值为1.5的酸洗,再反复洗三次均取沉淀。但我们第一次离心的时候几乎都没看到沉淀,为什么呢?还有什么比较好的浓缩方法?谢谢! 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • hecongren

    氧化亚铁硫杆菌的长度大概是0.5~2个微米,通常至少需要10000r/min离心才能沉淀下来。不明白为什么很多文献里都是用4000~6000r/min离心能收集菌体。

  • nimbleman

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by hecongren at 2013-04-15 11:05:21
    氧化亚铁硫杆菌的长度大概是0.5~2个微米,通常至少需要10000r/min离心才能沉淀下来。不明白为什么很多文献里都是用4000~6000r/min离心能收集菌体。

    后来反复洗了几次,汇集到一个管子里的时候就有了,也是4000r/min

  • chshen06188

    菌量太少吧,扩培一下再离心试试。

  • hecongren

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by nimbleman at 2013-04-16 14:56:12
    后来反复洗了几次,汇集到一个管子里的时候就有了,也是4000r/min...

    你离心后没有看到沉淀,那你是怎么清洗沉淀的啊?怎么倒掉上清液,取沉淀的啊?

  • nimbleman

    引用回帖:
    5楼: Originally posted by hecongren at 2013-04-17 10:32:29
    你离心后没有看到沉淀,那你是怎么清洗沉淀的啊?怎么倒掉上清液,取沉淀的啊?...

    老师让我们把上清液倒了,取点酸洗那个什么也看不到的试管,再把它们汇集到一个管里离心就有沉淀了

  • lemon_789

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by hecongren at 2013-04-15 11:05:21
    氧化亚铁硫杆菌的长度大概是0.5~2个微米,通常至少需要10000r/min离心才能沉淀下来。不明白为什么很多文献里都是用4000~6000r/min离心能收集菌体。

    细菌大小与离心转速之间具体有什么对应关系,求指点。我在做多环芳烃降解菌,离心也是发现沉淀很少,用的1000r/min,是不是太小了,但是太大又容易失活,有什么好的方法浓缩菌体呢?

  • snoopytbw

    引用回帖:
    7楼: Originally posted by lemon_789 at 2017-09-13 09:46:38
    细菌大小与离心转速之间具体有什么对应关系,求指点。我在做多环芳烃降解菌,离心也是发现沉淀很少,用的1000r/min,是不是太小了,但是太大又容易失活,有什么好的方法浓缩菌体呢?...

    AF的离心为什么要在6k左右,原因是因为离心体积通常都是500ml。用的是贝克曼的大型离心机,一旦到10k rpm或者g的话,一来没必要,二来比较危险,所以文献都是5k-6k。
    以前我用的方法是用2.0微米滤膜过滤,得到的液体再离心,可以显著的去除黄钾铁钒沉淀

    你做的降解菌,得率少,可能原因有很多,比如培养体系,生长速率,生物量等,大体积的细菌离心,其实6k已经很够了。你用1k显然是太低。至少5k以上吧,我离心是6k 30分钟离心

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