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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于氧化亚铁硫杆菌的浓缩问题，谢谢！
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nimbleman

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于氧化亚铁硫杆菌的浓缩问题，谢谢！

我们先培养1L的菌液，然后过滤，老师让我们拿滤液离心4000r/min，10min，取沉淀拿pH值为1.5的酸洗，再反复洗三次均取沉淀。但我们第一次离心的时候几乎都没看到沉淀，为什么呢？还有什么比较好的浓缩方法？谢谢！
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1楼 2013-03-25 16:35:30
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hecongren

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励新虫应助交流！ 2013-04-15 15:22:43
氧化亚铁硫杆菌的长度大概是0.5~2个微米，通常至少需要10000r/min离心才能沉淀下来。不明白为什么很多文献里都是用4000~6000r/min离心能收集菌体。
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自己选择的路，就是粉身碎骨也要走完
2楼2013-04-15 11:05:21
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nimbleman

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hecongren at 2013-04-15 11:05:21
氧化亚铁硫杆菌的长度大概是0.5~2个微米，通常至少需要10000r/min离心才能沉淀下来。不明白为什么很多文献里都是用4000~6000r/min离心能收集菌体。

后来反复洗了几次，汇集到一个管子里的时候就有了，也是4000r/min
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3楼2013-04-16 14:56:12
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chshen06188

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

菌量太少吧，扩培一下再离心试试。
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竹杖芒鞋轻胜马，一蓑风雨任平生。
4楼2013-04-16 15:49:18
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hecongren

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by nimbleman at 2013-04-16 14:56:12
后来反复洗了几次，汇集到一个管子里的时候就有了，也是4000r/min...

你离心后没有看到沉淀，那你是怎么清洗沉淀的啊？怎么倒掉上清液，取沉淀的啊？
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自己选择的路，就是粉身碎骨也要走完
5楼2013-04-17 10:32:29
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nimbleman

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hecongren at 2013-04-17 10:32:29
你离心后没有看到沉淀，那你是怎么清洗沉淀的啊？怎么倒掉上清液，取沉淀的啊？...

老师让我们把上清液倒了，取点酸洗那个什么也看不到的试管，再把它们汇集到一个管里离心就有沉淀了
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6楼2013-04-24 20:31:45
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lemon_789

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hecongren at 2013-04-15 11:05:21
氧化亚铁硫杆菌的长度大概是0.5~2个微米，通常至少需要10000r/min离心才能沉淀下来。不明白为什么很多文献里都是用4000~6000r/min离心能收集菌体。

细菌大小与离心转速之间具体有什么对应关系，求指点。我在做多环芳烃降解菌，离心也是发现沉淀很少，用的1000r/min，是不是太小了，但是太大又容易失活，有什么好的方法浓缩菌体呢？
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7楼2017-09-13 09:46:38
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by lemon_789 at 2017-09-13 09:46:38
细菌大小与离心转速之间具体有什么对应关系，求指点。我在做多环芳烃降解菌，离心也是发现沉淀很少，用的1000r/min，是不是太小了，但是太大又容易失活，有什么好的方法浓缩菌体呢？...

AF的离心为什么要在6k左右，原因是因为离心体积通常都是500ml。用的是贝克曼的大型离心机，一旦到10k rpm或者g的话，一来没必要，二来比较危险，所以文献都是5k-6k。
以前我用的方法是用2.0微米滤膜过滤，得到的液体再离心，可以显著的去除黄钾铁钒沉淀

你做的降解菌，得率少，可能原因有很多，比如培养体系，生长速率，生物量等，大体积的细菌离心，其实6k已经很够了。你用1k显然是太低。至少5k以上吧，我离心是6k 30分钟离心。
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8楼2017-09-13 11:05:13
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