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福林酚法测定酸性和中性蛋白酶

作者 青青一麦
来源: 小木虫 300 6 举报帖子
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用福林酚法测定冬虫夏草菌粉中的酸性蛋白酶和中性蛋白酶活性,所有步骤都按文献操作,试剂的配置都是参考了很多文献,为什么做了好几遍就是不显色呢?该开始有点淡淡的蓝色,40摄氏度保温显色 就直接变成物色,问题出在哪了?福林酚试剂是自己制的,为黄绿色,按1:3稀释使用,酸性蛋白缓冲液为3.0乳酸缓冲液,中性用PH7.5的磷酸缓冲液。 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • xiaoer0330

    显色之前是绿色,显色结束以后该是蓝色,我们的福林酚是Sigma的 其本身的颜色也是淡淡的荧光黄色

  • 0203080204

    样品得确定合适的稀释倍数,稀释倍数过高,看起来就不显色了。。

  • junmove

    我最近也在做蛋白酶的活性,将前人做过的已知有活性的及自己的,测活性都测不出来。不知道什么原因

  • 青青一麦

    引用回帖:
    4楼: Originally posted by junmove at 2013-04-26 15:58:53
    我最近也在做蛋白酶的活性,将前人做过的已知有活性的及自己的,测活性都测不出来。不知道什么原因

    你测得是什么东西啊,我测得是真菌菌丝里面的,每次都是负值,即使偶尔出现个正值,也没有重复性,实在愁死我了

  • 青青一麦

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by 0203080204 at 2013-04-12 09:15:06
    样品得确定合适的稀释倍数,稀释倍数过高,看起来就不显色了。。

    我的样品直接没稀释,用原液测得,但是 如果如果将原液放置一定时间之后显色非常深,不知道怎么回事

  • 木源

    请问一下楼主乳酸和乳酸钠的称量国标上是称重再稀释定容,是直接用液体来称重量还是需要转化成体积呢?因为试剂都是液体。

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