怎么分离抗体和与抗体连接好的材料
将抗体与我们制备的材料（~50nm）用的EDC和NHS连接，最后怎样才能把没连上抗体的洗掉，得到比较纯的连接物呢？ the free non-conjugated QDs and byproduct isourea were removed by ultrafiltration using 100 K Nanosep centrifugal devices by centrifugation at 5000 rmp for 15 min.The lower phase, contain-ing free QDs and isourea, were discarded. To wash the conju-gate and reduce the impurities, the upper phase, containing QD-IgG, was diluted by 300 L PBS buffer, and additionally subjected to centrifugation at 5000 rmp for 15 min. This washing step was repeated twice. The conjugate was recovered by 100 L of PBS and transferred to a new Eppendorf tube and then stored at 4 °C in a dark until use. 实验刚起步，觉得ODs-lgG的大小跟ODs的差不多耶，因该混在一起吧，不理解文献中的方法。谢谢各位师兄师姐指点~
返回小木虫查看更多
今日热帖
京公网安备 11010802022153号
什么试剂呀?
这个要看量子点的粒径大小和在溶液体系中的分散性如何了。
可以试试通过简单离心的方法，蛋白在溶液，4000~5000rpm的离心速度不容易离心下去，如果量子点能够离下去，就能分离开了，然后对离心物进行清洗几次，把结合不牢的洗去就OK了。
谢谢啦^_^
QDs下去了，那么ODs-抗体的也会下去吧~这样怎么分离它们俩呢
，
额，如果比例合适的话，QDs表面基本上都标记了吧，不知道你还做不做封闭？
我们不是用的QDs，是用的上转换连的是氨基，原理差不多嘛。不懂文献那种方法是怎么分离滴。
他们进行了超滤分离， "the free non-conjugated QDs and byproduct isourea were removed by ultrafiltration using 100 K Nanosep centrifugal devices by centrifugation at 5000 rmp for 15 min" 也就是说用离心的方法，离心管是套式的（大离心管里面有小离心管，中间有滤膜的那种），这个跟做PCR之前的核酸提取方法差不多，标记好的QDs留在了上层里，free的滤到了下层（The lower phase, contain-ing free QDs and isourea, were discarded.）。