当前位置: 首页 > 有奖问答 >求助,SDS-PAGE电泳图(Marker最后一个条带跑不出,胶底部很奇怪)

求助,SDS-PAGE电泳图(Marker最后一个条带跑不出,胶底部很奇怪)

作者 ming827
来源: 小木虫 550 11 举报帖子
+关注

12%分离胶110V,4%浓缩胶70V,Marker共10条,但是最后一条基本看不见,胶底部很奇怪不明原因,求高手指点!~~


2012.12.6.jpg 返回小木虫查看更多

今日热帖
  • 精华评论
  • ming827

    提的是对虾肌肉全蛋白,用裂解液提取,但是底部不明白为什么会出现这种状况,是蛋白样品的问题还是电泳的问题,求高手指点指点!~

  • 544534326

    引用回帖:
    2楼: Originally posted by ming827 at 2012-12-06 18:48:12
    提的是对虾肌肉全蛋白,用裂解液提取,但是底部不明白为什么会出现这种状况,是蛋白样品的问题还是电泳的问题,求高手指点指点!~

    有没有做重复试验呢?若重复还是如此,可能是因为裂解液的ph值与电极缓冲液差别太大,离子有些漂移。。。。

  • ming827

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by 544534326 at 2012-12-06 19:37:25
    有没有做重复试验呢?若重复还是如此,可能是因为裂解液的ph值与电极缓冲液差别太大,离子有些漂移。。。。...

    有做,几次都是这样,底部都出现这个问题,而且Marker的最后一个条带总也跑不出,如何解决呢?

  • yangyu790112

    引用回帖:
    3楼: Originally posted by 544534326 at 2012-12-06 19:37:25
    有没有做重复试验呢?若重复还是如此,可能是因为裂解液的ph值与电极缓冲液差别太大,离子有些漂移。。。。...

    基本同意3楼的想法,不知道你的裂解液的成分是什么,建议可以用pH近中性的缓冲液(TE或Tris)换一下你的样品的缓冲体系,在跑一次。

  • ming827

    引用回帖:
    5楼: Originally posted by yangyu790112 at 2012-12-06 21:02:20
    基本同意3楼的想法,不知道你的裂解液的成分是什么,建议可以用pH近中性的缓冲液(TE或Tris)换一下你的样品的缓冲体系,在跑一次。...

    8M尿素,2M硫脲,4%CHAPS,1%DTT,1%IPG-Buffer。刚接触这方面的知识,不是很了解,能详细说说吗,如何换,是替换成分中的试剂?替换哪种?谢谢指导!

  • yangyu790112

    引用回帖:
    6楼: Originally posted by ming827 at 2012-12-06 21:42:32
    8M尿素,2M硫脲,4%CHAPS,1%DTT,1%IPG-Buffer。刚接触这方面的知识,不是很了解,能详细说说吗,如何换,是替换成分中的试剂?替换哪种?谢谢指导!...

    8M尿素会导致样品盐浓度过高,换缓冲液,并不是指替换裂解液中的某种成分,而是先正常进行样品裂解,再用温和的缓冲体系替换样品溶液中的裂解液成分(即除盐),如果你的实验室有超滤离心管,工作原理非常简单,试试吧

  • 544534326

    引用回帖:
    6楼: Originally posted by ming827 at 2012-12-06 21:42:32
    8M尿素,2M硫脲,4%CHAPS,1%DTT,1%IPG-Buffer。刚接触这方面的知识,不是很了解,能详细说说吗,如何换,是替换成分中的试剂?替换哪种?谢谢指导!...

    的确离子浓度过高

猜你喜欢