12%分离胶110V,4%浓缩胶70V,Marker共10条,但是最后一条基本看不见,胶底部很奇怪不明原因,求高手指点!~~ 2012.12.6.jpg 返回小木虫查看更多
提的是对虾肌肉全蛋白,用裂解液提取,但是底部不明白为什么会出现这种状况,是蛋白样品的问题还是电泳的问题,求高手指点指点!~
提的是对虾肌肉全蛋白,用裂解液提取,但是底部不明白为什么会出现这种状况,是蛋白样品的问题还是电泳的问题,求高手指点指点!~
有没有做重复试验呢?若重复还是如此,可能是因为裂解液的ph值与电极缓冲液差别太大,离子有些漂移。。。。
有做,几次都是这样,底部都出现这个问题,而且Marker的最后一个条带总也跑不出,如何解决呢?
基本同意3楼的想法,不知道你的裂解液的成分是什么,建议可以用pH近中性的缓冲液(TE或Tris)换一下你的样品的缓冲体系,在跑一次。
8M尿素,2M硫脲,4%CHAPS,1%DTT,1%IPG-Buffer。刚接触这方面的知识,不是很了解,能详细说说吗,如何换,是替换成分中的试剂?替换哪种?谢谢指导!
8M尿素会导致样品盐浓度过高,换缓冲液,并不是指替换裂解液中的某种成分,而是先正常进行样品裂解,再用温和的缓冲体系替换样品溶液中的裂解液成分(即除盐),如果你的实验室有超滤离心管,工作原理非常简单,试试吧
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的确离子浓度过高