第一，沉淀的问题。最好在灌流实验前就测定样品在灌流液中的稳定性，溶解性，可以采用 k-r solution或者 k-r solution灌流流出液进行稳定性考察。看看样品是否存在明显的降解或者沉淀。
第二，吸附的问题。药物溶液流经蠕动泵管路（不接动物肠段），对比浓度变化，如果吸附很厉害，就先吸附饱和再进行灌流实验。
第三，灌流肠段的问题。最多可以选三个肠段进行实验，但肠段一定不要太长，长了未必吸收量就大，越长影响因素越多。最好能够固定流出流入管，保证其在灌流过程中不被碰到，从而确保单位时间流出液体积的相对恒定，否则计算会很头疼的。
第四，出血什么的问题。结扎管子的时候尽可能小心，避开大血管的位置，而且注意大鼠的麻醉，一般不动的话不会怎么出血的。

最后祝实验顺利。

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9楼: Originally posted by jonathonswq at 2012-06-30 13:23:55
第一，沉淀的问题。最好在灌流实验前就测定样品在灌流液中的稳定性，溶解性，可以采用 k-r solution或者 k-r solution灌流流出液进行稳定性考察。看看样品是否存在明显的降解或者沉淀。
第二，吸附的问题。药物溶液 ...

再请教一下1.沉淀是灌流液中的钙产生了沉淀,刚配好的时候调节pH是澄清的,但是37度水浴后就有沉淀产生了,这个情况怎么处理?
2.吸收速率常数大学有什么等级划分么,就想Papp一样,大于什么等级属于容易吸收小于什么等级属于难吸收?谢谢了

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10楼: Originally posted by guo2010 at 2012-06-30 17:05:18
再请教一下1.沉淀是灌流液中的钙产生了沉淀,刚配好的时候调节pH是澄清的,但是37度水浴后就有沉淀产生了,这个情况怎么处理?
2.吸收速率常数大学有什么等级划分么,就想Papp一样,大于什么等级属于容易吸收小于什么等 ...

灌流液那个，以前我们是买的粉直接配溶液就行，没看到沉淀的情况。建议买粉或者自己重新配。还有就是可能肠道内容物导致沉淀出现的，如果是这样就多冲一会，后面的再上含药的灌流液。
吸收速率分级这个，不太记得了，你找几篇好点文献看看应该都有写的。这个帮不了你了。

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11楼: Originally posted by jonathonswq at 2012-07-01 18:51:27
灌流液那个，以前我们是买的粉直接配溶液就行，没看到沉淀的情况。建议买粉或者自己重新配。还有就是可能肠道内容物导致沉淀出现的，如果是这样就多冲一会，后面的再上含药的灌流液。
吸收速率分级这个，不太记得 ...

你试验的过程中有没有出现流出液药物浓度大于灌流液的现象?我有两个间隔75分钟的时间点出现流出液浓度大于灌流液的现象,我结扎胆管了,可能的原因回事什么呢?还有你有没有做过体外实验用过肠原代细胞么?
谢谢啦!

灌流液浓度高可能是因为流出体积太小了，这就是我前面提到的，你要保证流出液体体积的相对稳定，最好每个时间段都差不多。这点很重要。最好在实验过程中做好大鼠腹腔的补液，否则可能会出现上述问题。
我以前做过caco-2细胞，但这种细胞是结肠腺癌细胞非原代细胞，原代细胞的培养真心不熟。

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13楼: Originally posted by jonathonswq at 2012-07-02 10:26:39
灌流液浓度高可能是因为流出体积太小了，这就是我前面提到的，你要保证流出液体体积的相对稳定，最好每个时间段都差不多。这点很重要。最好在实验过程中做好大鼠腹腔的补液，否则可能会出现上述问题。
我以前做过c ...

肠腔液的补充是要在腹腔滴生理盐水么?我做实验的时候是把肠段结扎了之后又放回腹腔然后盖了纱布,纱布上滴37度生理盐水的,是不仅要做纱布上滴生理盐水还要在腹腔滴么?
Peff的计算是一只大鼠灌流的120分钟求一个平均值然后算作一个数据么?
流出液浓度增大的确可能是你说的原因,我在换西林瓶是动了插管~~~~(>_<)~~~~
谢谢啦!

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14楼: Originally posted by guo2010 at 2012-07-02 17:02:50
肠腔液的补充是要在腹腔滴生理盐水么?我做实验的时候是把肠段结扎了之后又放回腹腔然后盖了纱布,纱布上滴37度生理盐水的,是不仅要做纱布上滴生理盐水还要在腹腔滴么?
Peff的计算是一只大鼠灌流的120分钟求一个平均 ...

按理说用吸满生理盐水的纱布就可以了，不需要再往腹腔滴加的。不过如果是麻醉效果不好的话，或者持续时间不够的话可以往腹腔滴几点麻醉剂。
计算Peff的时候，可以计算每个时间间隔的通透值，然后再平均。有些实验中可能存在饱和什么的，药物减少的速度会越来越慢的，所以120分钟内平均是不对的，要是这样的话，索性直接取120分钟那个点好了。
关于Peff的计算这一块，好多涉及到肠灌流的学位论文有详细的表述，建议你多看看学位论文方面的资料
，

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15楼: Originally posted by jonathonswq at 2012-07-03 12:24:38
按理说用吸满生理盐水的纱布就可以了，不需要再往腹腔滴加的。不过如果是麻醉效果不好的话，或者持续时间不够的话可以往腹腔滴几点麻醉剂。
计算Peff的时候，可以计算每个时间间隔的通透值，然后再平均。有些实验 ...

好的,谢谢啦,有问题在向你请教O(∩_∩)O~