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guo2010

金虫 (小有名气)

[求助] 肠灌流实验中产生沉淀及插管问题

大侠们,我在做肠灌流实验是发生37℃水浴时灌流液会有沉淀发生,然后沉淀吸附在管路上影响进一步的实验,有没有同志可以提供一下意见,感谢万分!
还有就是同时可以做几个肠段,要用什么样的管子,有什么注意的?希望大家能提出宝贵意见,感激不尽.
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1楼 2012-06-17 11:11:55
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回帖置顶 ( 共有1个 )

jonathonswq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
guo2010: 金币+50, 博学EPI+1, ★★★★★最佳答案 2012-06-30 16:42:39
第一，沉淀的问题。最好在灌流实验前就测定样品在灌流液中的稳定性，溶解性，可以采用 k-r solution或者 k-r solution灌流流出液进行稳定性考察。看看样品是否存在明显的降解或者沉淀。
第二，吸附的问题。药物溶液流经蠕动泵管路（不接动物肠段），对比浓度变化，如果吸附很厉害，就先吸附饱和再进行灌流实验。
第三，灌流肠段的问题。最多可以选三个肠段进行实验，但肠段一定不要太长，长了未必吸收量就大，越长影响因素越多。最好能够固定流出流入管，保证其在灌流过程中不被碰到，从而确保单位时间流出液体积的相对恒定，否则计算会很头疼的。
第四，出血什么的问题。结扎管子的时候尽可能小心，避开大血管的位置，而且注意大鼠的麻醉，一般不动的话不会怎么出血的。

最后祝实验顺利。
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面对滇池，背靠西山，听龙门风雨，看海梗海鸥飞翔。
9楼2012-06-30 13:23:55
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jonathonswq

木虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by guo2010 at 2012-07-02 17:02:50
肠腔液的补充是要在腹腔滴生理盐水么?我做实验的时候是把肠段结扎了之后又放回腹腔然后盖了纱布,纱布上滴37度生理盐水的,是不仅要做纱布上滴生理盐水还要在腹腔滴么?
Peff的计算是一只大鼠灌流的120分钟求一个平均 ...

按理说用吸满生理盐水的纱布就可以了，不需要再往腹腔滴加的。不过如果是麻醉效果不好的话，或者持续时间不够的话可以往腹腔滴几点麻醉剂。
计算Peff的时候，可以计算每个时间间隔的通透值，然后再平均。有些实验中可能存在饱和什么的，药物减少的速度会越来越慢的，所以120分钟内平均是不对的，要是这样的话，索性直接取120分钟那个点好了。
关于Peff的计算这一块，好多涉及到肠灌流的学位论文有详细的表述，建议你多看看学位论文方面的资料。
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面对滇池，背靠西山，听龙门风雨，看海梗海鸥飞翔。
15楼2012-07-03 12:24:38
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普通回帖

发芽豆LL
2楼2012-06-17 11:41:32
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guo2010

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 发芽豆LL at 2012-06-17 11:41:32

忘提出宝贵意见
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3楼2012-06-17 12:49:50
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guo2010

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 发芽豆LL at 2012-06-17 11:41:32

望提出宝贵意见
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4楼2012-06-17 12:50:01
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qingheyouyou
5楼2012-06-17 13:21:19
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guo2010

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by qingheyouyou at 2012-06-17 13:21:19

期待您的宝贵意见
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6楼2012-06-17 20:35:22
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guo2010

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by qingheyouyou at 2012-06-17 13:21:19

期待您的宝贵意见
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7楼2012-06-17 20:38:37
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guo2010

金虫 (小有名气)
自己顶一下,谁能帮我解答?
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8楼2012-06-19 17:31:03
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guo2010

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by jonathonswq at 2012-06-30 13:23:55
第一，沉淀的问题。最好在灌流实验前就测定样品在灌流液中的稳定性，溶解性，可以采用 k-r solution或者 k-r solution灌流流出液进行稳定性考察。看看样品是否存在明显的降解或者沉淀。
第二，吸附的问题。药物溶液 ...

再请教一下1.沉淀是灌流液中的钙产生了沉淀,刚配好的时候调节pH是澄清的,但是37度水浴后就有沉淀产生了,这个情况怎么处理?
2.吸收速率常数大学有什么等级划分么,就想Papp一样,大于什么等级属于容易吸收小于什么等级属于难吸收?谢谢了
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10楼2012-06-30 17:05:18
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