真菌(青霉)纯化问题
我有一株真菌,通过ITS比对,是青霉,但在PDA生长很慢,而且只长孢子,所以纯化很麻烦,我纯得一株。接种菌块,在试管里培养得打孢子种子液,用孢子液涂布平板,长出来的菌落,在同一个平板上,开始都是一样的白色菌落,培养一段时间,原本一样的菌落表现出有不同的菌落特征,分别挑起不同菌落培养,提取DNA,扩ITS,测序比对,原来在同一块平板上的不同菌落菌,测序结果,比对后同源性很高,应该是同一株菌。
有没有人遇到这样类似的情况?
照片在下;
不同菌落照片改天补上;
补上两个不同菌落图片,两个菌ITS序列同源性很高95%,从20-510的碱基序列全部相同。
[ Last edited by Hannet on 2011-6-30 at 11:56 ] 返回小木虫查看更多
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在同一种培养基的平板上形态不同,就表示各自基因间有差别,所以就不能称为同一株菌株。但是可能为同一种,因为分类学上种下面还有亚种和变种。
怪不得我测他们的ITS(500bp)几乎一样,那有没有什么分子手段区分鉴别他们?
ITS鉴定是存在争议的,既然菌落形态不同,那么仅凭某一个片段的DNA可能也难以表现出足够的差异,或许要更多的鉴定方式。你的这个实验是不是一定要鉴定清楚这三个菌株的种?因为往后鉴定可能要花更多的钱。
可能不是亚种变种的问题,只是简单的平板营养的问题,比如说大的菌落的地方营养就贫乏,引起霉菌的形态就会略有不同。它们基因组间是没有区别的,但是活跃的基因有差别
[ Last edited by ganchao1776 on 2011-8-18 at 00:02 ]
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你遇到过这样的事情?能不能放照片出来让大家学习一下?
没事你试试吧,这种情况很常见的,如果你仔细观察的话同一块平板上的每一个菌落都不一样的,你能依据这个说他们是不同的亚种吗?图片我没有,信不信由你
孢子分离的有个问题,是有性产物,后代表型可能会有小小的差异的。ITS有差异应该是测序的问题了。