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【求助/交流】请教问题

作者 puguilin
来源: 小木虫 250 5 举报帖子
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最近做了关于植物提取RNA,并反转录形成cDNA,用设计的3个目的基因的引物分别进行PCR后检测,发现只有一个基因有条带,跑了出来,而其他两个基因还没出来,由于是初学者,想问问:
   未跑出来的基因是由于植物体内本身并未表达呢?还是由于引物设计上出了问题,还是由于最优化的PCR体系还未摸清?
非常感谢各位大哥大姐帮我分析分析!谢谢了! 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • gao-feng

    你用基因组扩增一下这两个基因试试,基因组中式会有你的目的基因的。能扩出来就不是引物问题了。

  • amilie030312

    这个问题就有很多回答了,以为啥情况都可能,先确定是否有这个基因,如果有这个基因但没扩增出来那就可以怀疑一下是否引物设计有问题,如果还确定了引物没有问题那就看是不是退火温度不对,是不是GC含量过高,再看看是否有连续的同一个碱基,这些都有影响的。
    我想没办法给出你一个唯一的回答,

  • 780871756

    我也遇到这个情况

  • 780871756

    反转录形成的cdna用特异性引物去扩,,为什么条带那么弱啊,,,

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