各位虫友: 请问用琼脂糖怎么固定悬浮细胞?或有其他更好的固定方法。 返回小木虫查看更多
目前人工固定的方法主要有3 种:①琼脂糖包埋法,即把低熔点的琼脂糖熔化,冷却到一定温度后将制备的细胞悬浮液混合于琼脂糖中,并使细胞体的一半埋在琼脂糖中而固定,一半暴露在琼脂糖的表面以便于进行显微注射;②多聚-L-赖氨酸粘连法,即先用多聚-L-赖氨酸处理玻片表面,由于多聚-L-赖氨酸对细胞有粘连作用。因此当分离的细胞或原生质体与玻片接触时,就可被固定在玻片上;③吸管支持法,即用一固定的毛细管将原生质体或细胞吸附在管口,起到固定作用。并且吸管可以旋转或移动位置,使操作者选择最佳位置进行注射。显微注射用的微针通常用拉针机制备,针尖直径以0.5 μm左右为宜。一次注入的DNA量约为10-9 mol,
目前人工固定的方法主要有3 种:①琼脂糖包埋法,即把低熔点的琼脂糖熔化,冷却到一定温度后将制备的细胞悬浮液混合于琼脂糖中,并使细胞体的一半埋在琼脂糖中而固定,一半暴露在琼脂糖的表面以便于进行显微注射;②多聚-L-赖氨酸粘连法,即先用多聚-L-赖氨酸处理玻片表面,由于多聚-L-赖氨酸对细胞有粘连作用。因此当分离的细胞或原生质体与玻片接触时,就可被固定在玻片上;③吸管支持法,即用一固定的毛细管将原生质体或细胞吸附在管口,起到固定作用。并且吸管可以旋转或移动位置,使操作者选择最佳位置进行注射。显微注射用的微针通常用拉针机制备,针尖直径以0.5 μm左右为宜。一次注入的DNA量约为10-9 mol,