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zhangyu7901木虫 (著名写手)
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[交流]
固定细胞的方法
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各位虫友： 请问用琼脂糖怎么固定悬浮细胞？或有其他更好的固定方法。 |
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daqingrjb
金虫 (著名写手)
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zhangyu7901(金币+50, 博学EPI+1):很详细，谢谢 2010-07-12 15:52:55
| 目前人工固定的方法主要有3 种：①琼脂糖包埋法，即把低熔点的琼脂糖熔化，冷却到一定温度后将制备的细胞悬浮液混合于琼脂糖中，并使细胞体的一半埋在琼脂糖中而固定，一半暴露在琼脂糖的表面以便于进行显微注射；②多聚-L-赖氨酸粘连法，即先用多聚-L-赖氨酸处理玻片表面，由于多聚-L-赖氨酸对细胞有粘连作用。因此当分离的细胞或原生质体与玻片接触时，就可被固定在玻片上；③吸管支持法，即用一固定的毛细管将原生质体或细胞吸附在管口，起到固定作用。并且吸管可以旋转或移动位置，使操作者选择最佳位置进行注射。显微注射用的微针通常用拉针机制备，针尖直径以0.5 μm左右为宜。一次注入的DNA量约为10-9 mol。 |
2楼2010-07-12 12:14:21
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