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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞固定后膜的完整性是否受损~~
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马龙sweeting

木虫 (正式写手)

[交流] 细胞固定后膜的完整性是否受损~~

我使用Hoechst/PI双染检测细胞凋亡和坏死~~请问可不可以先将细胞固定后再染色~~不知道固定后细胞膜的完整性是否会被破坏，而造成所有细胞都能被PI染上~~另请问细胞固定的方法，使用何种固定液~~
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1楼 2012-07-04 09:58:40
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生物小通

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖！ 2012-07-04 13:51:05
好似一般的固定液都会杀死细胞，这样的话你地实验目的就挂了，更不用说细胞膜完整性和通透性了。让细胞直接贴壁得了。
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2楼2012-07-04 12:45:13
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geek23

木虫 (小有名气)
★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
测凋亡时,应该不用固定.固定必然会破坏细胞膜造成假阳性.
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4楼2012-07-05 08:13:44
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myfinalway

木虫 (正式写手)
★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
固定细胞分很多种，
如果怕损害细胞膜就不要用丙酮，用甲醛或者多聚甲醛
对细胞损伤小
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5楼2012-07-05 15:15:21
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l_h_10

金虫 (小有名气)
★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
固定后膜的完整性绝对受损，我做过的，如果固定后再染PI，几乎全部染色。用Hoechst/PI双染检测细胞凋亡和坏死的话，如果是用流式的话，没有测过，这个要看试剂盒的说明书了。如果使用显微镜观察的话，可以先用PI染色，然后固定，再染Hoechst。
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6楼2012-07-05 20:11:41
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晚香玉

木虫 (正式写手)
★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
固定的死细胞染色都会破坏的，膜不打开的话染料也不好进去
活细胞染色的话影响不大
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7楼2012-07-05 20:22:18
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schorr

铁杆木虫 (正式写手)
★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
Hoechst33342染活细胞核呈蓝色，PI染死细胞核呈红色；
检测细胞凋亡和坏死不可以先将细胞固定后再染色，固定后细胞膜的完整性会被破坏，而造成所有细胞都能被PI染上。
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8楼2012-07-12 09:18:21
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qinhui

银虫 (小有名气)
★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
谁用过FDA/PI对细胞染色啊？就是两种染色剂同时用。我第一次做这个，感觉力不从心啊~求教~
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9楼2013-05-08 19:27:14
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简单回复
yingying15883楼
2012-07-04 17:22   回复  
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
祝福祝福
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