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细胞固定后膜的完整性是否受损~~
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马龙sweeting
木虫
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[交流]
细胞固定后膜的完整性是否受损~~
我使用Hoechst/PI双染检测细胞凋亡和坏死~~请问可不可以先将细胞固定后再染色~~不知道固定后细胞膜的完整性是否会被破坏,而造成所有细胞都能被PI染上~~另请问细胞固定的方法,使用何种固定液~~
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2012-07-04 09:58:40
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生物小通
木虫
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yqbter: 金币+2, 鼓励发帖!
2012-07-04 13:51:05
好似一般的固定液都会杀死细胞,这样的话你地实验目的就挂了,更不用说细胞膜完整性和通透性了。让细胞直接贴壁得了。
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2楼
2012-07-04 12:45:13
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geek23
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★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
测凋亡时,应该不用固定.固定必然会破坏细胞膜造成假阳性.
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4楼
2012-07-05 08:13:44
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myfinalway
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★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
固定细胞分很多种,
如果怕损害细胞膜就不要用丙酮,用甲醛或者多聚甲醛
对细胞损伤小
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5楼
2012-07-05 15:15:21
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l_h_10
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★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
固定后膜的完整性绝对受损,我做过的,如果固定后再染PI,几乎全部染色。用Hoechst/PI双染检测细胞凋亡和坏死的话,如果是用流式的话,没有测过,这个要看试剂盒的说明书了。如果使用显微镜观察的话,可以先用PI染色,然后固定,再染Hoechst。
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6楼
2012-07-05 20:11:41
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晚香玉
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马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
固定的死细胞染色都会破坏的,膜不打开的话染料也不好进去
活细胞染色的话影响不大
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7楼
2012-07-05 20:22:18
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schorr
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★
马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
Hoechst33342染活细胞核呈蓝色,PI染死细胞核呈红色;
检测细胞凋亡和坏死不可以先将细胞固定后再染色,固定后细胞膜的完整性会被破坏,而造成所有细胞都能被PI染上。
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8楼
2012-07-12 09:18:21
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qinhui
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马龙sweeting(金币+1): 谢谢参与
谁用过FDA/PI对细胞染色啊?就是两种染色剂同时用。我第一次做这个,感觉力不从心啊~求教~
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9楼
2013-05-08 19:27:14
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yingying1588
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2012-07-04 17:22
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