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DNA的沉淀问题

作者 wuweibewin: 来源: 小木虫 500 10 举报帖子

DNA（CTAB法大量提取，用于Southern杂交）用无水乙醇（或异丙醇）沉淀，发现有两种形态，一是DNA抱成团状，可用剪头移液枪转移;另一则是成散絮状（碎片状），只能用离心的方法得到沉淀；
谁能解释一下不同形态形成的原因？是否与DNA浓度、质量、以及材料处理方法有关？

本人今年一月份所沉的DNA均呈团状，而最近提的却既有团状又有碎片状，有一次甚至都是碎片状。返回小木虫查看更多

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精华评论

wuweibewin

引用回帖:
Originally posted by 柳飞絮 at 2010-06-07 20:52:04:

研磨程度增大DNA会不会发生断裂呢

这个应该不会！研磨程度再高，而不足以损害大分子物质!
不过后续实验发现，DNA纯度受到一定的影响
wuweibewin

引用回帖:
Originally posted by 柳飞絮 at 2010-06-07 20:52:04:

研磨程度增大DNA会不会发生断裂呢

现在看来主要是纯度问题，溶解DNA时发现有大量变性蛋白混入！
估计是  1、抽提时过于小心，未抽提完全
   2 、抽提离心后吸液时，吸到了中间层
   3、利用离心的方法获得沉淀，会是一些杂质也混入
第二遍抽提时抽提力度增加，洗液量减少，发现原来六管沉后又全呈团状了
，
柳飞絮

引用回帖:
Originally posted by wuweibewin at 2010-06-08 16:28:42:

现在看来主要是纯度问题，溶解DNA时发现有大量变性蛋白混入！
估计是  1、抽提时过于小心，未抽提完全
   2 、抽提离心后吸液时，吸到了中间层
   3、利用离心的方法获得沉淀，会是一些杂质也混入
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恭喜楼主实验成功，学习了