如果我在多克隆位点BamHI 和HindIII 之间插入目的片段,而且含有起始密码子ATG,请问pET28a rbs后面这么多ATG,那从哪个开始翻译啊? 谢谢回复 返回小木虫查看更多
从NcoI那个ATG开始翻译
那么编码出来的是一种蛋白吗? 应该不全从第一个ATG开始吧?有没有偏爱哪一个?
从第一个开始翻译,载体上不是已经翻译出对应的氨基酸序列了嘛。
从NcoI开始,前面的RBS序列和起始密码子之间的距离优化过的,这个距离应该表达效果最好。还有就是后面的那个His-tag,如果从NdeI开始,前面的的tag完全没用了。我想是这样的,个人意见,
不是从NcoI后面的ATG开始的,如果那样,那不是每个蛋白表达出来都带有his tag?我做过表达出来的就没有his tag的,后来是我设计引物,重新构建载体后表达的蛋白才有his tag的。
从NcoI那个ATG开始翻译
那么编码出来的是一种蛋白吗? 应该不全从第一个ATG开始吧?有没有偏爱哪一个?
从第一个开始翻译,载体上不是已经翻译出对应的氨基酸序列了嘛。
从NcoI开始,前面的RBS序列和起始密码子之间的距离优化过的,这个距离应该表达效果最好。还有就是后面的那个His-tag,如果从NdeI开始,前面的的tag完全没用了。我想是这样的,个人意见,
不是从NcoI后面的ATG开始的,如果那样,那不是每个蛋白表达出来都带有his tag?我做过表达出来的就没有his tag的,后来是我设计引物,重新构建载体后表达的蛋白才有his tag的。