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【求助/交流】pET28a多克隆位点后面多个ATG哪个起始?

作者 xiangao
来源: 小木虫 300 6 举报帖子
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如果我在多克隆位点BamHI 和HindIII 之间插入目的片段,而且含有起始密码子ATG,请问pET28a rbs后面这么多ATG,那从哪个开始翻译啊? 谢谢回复 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • gyesang

    从NcoI那个ATG开始翻译

  • xiangao

    那么编码出来的是一种蛋白吗? 应该不全从第一个ATG开始吧?有没有偏爱哪一个?

  • susizheng

    从第一个开始翻译,载体上不是已经翻译出对应的氨基酸序列了嘛。

  • yuanfeng

    从NcoI开始,前面的RBS序列和起始密码子之间的距离优化过的,这个距离应该表达效果最好。还有就是后面的那个His-tag,如果从NdeI开始,前面的的tag完全没用了。我想是这样的,个人意见,

  • muchong5577

    不是从NcoI后面的ATG开始的,如果那样,那不是每个蛋白表达出来都带有his tag?我做过表达出来的就没有his tag的,后来是我设计引物,重新构建载体后表达的蛋白才有his tag的。

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