我用15ml的TAE做的1%的琼脂糖凝胶,35min跑完,凝胶成像系统拍照,发现靠近点样孔的一半比较亮,而远离的一半很黑,marker一部分条带看不清,现在怀疑时间不够,我是分子新手,请大家帮我分析一下 返回小木虫查看更多
120V跑25分钟左右。
Marker部分条带看不清。 如果跑在最前面的条带看不清,是胶的问题。 如果是靠近加样孔地方,找不到相应的条带,可能是条带还没有跑开,适当加长时间。 电流时间不是死规定的,根据你的目的条带大小来确定,loading buffer有指示,即使拿出来拍照后,也可以放回去继续跑。
120v ,一般二十分钟 具体看目的条带大小了 楼上正解
这个应该没有一个标准的数值,看自己的条件和物质的性能了!
100V 25min
120V半个小时左右,在蓝带过了2/3就差不多了!
1%用来跑1Kbp以下的带,1Kbp以上正常的通常是0.7%,比如楼主抽的质粒啊之类的。 loading buffer最下面一条带大约是(0.7%的胶为标准)500bp,最上面的大约是4500bp 如果你抽的是总DNA,那loading buffer最上面一条带跑出去的,在跑20分钟也无所谓 所以不能看电压的电泳时间,要看你的检测质粒大小等因素,
120V跑25分钟左右。
Marker部分条带看不清。
如果跑在最前面的条带看不清,是胶的问题。
如果是靠近加样孔地方,找不到相应的条带,可能是条带还没有跑开,适当加长时间。
电流时间不是死规定的,根据你的目的条带大小来确定,loading buffer有指示,即使拿出来拍照后,也可以放回去继续跑。
120v ,一般二十分钟 具体看目的条带大小了 楼上正解
这个应该没有一个标准的数值,看自己的条件和物质的性能了!
100V 25min
120V半个小时左右,在蓝带过了2/3就差不多了!
1%用来跑1Kbp以下的带,1Kbp以上正常的通常是0.7%,比如楼主抽的质粒啊之类的。
loading buffer最下面一条带大约是(0.7%的胶为标准)500bp,最上面的大约是4500bp
如果你抽的是总DNA,那loading buffer最上面一条带跑出去的,在跑20分钟也无所谓
所以不能看电压的电泳时间,要看你的检测质粒大小等因素,