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wangjinna

银虫 (正式写手)

[交流] 弱弱的问一下,大家跑电泳的时间是多少?

我用15ml的TAE做的1%的琼脂糖凝胶,35min跑完,凝胶成像系统拍照,发现靠近点样孔的一半比较亮,而远离的一半很黑,marker一部分条带看不清,现在怀疑时间不够,我是分子新手,请大家帮我分析一下
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goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子

★ ★
小木虫(金币+0.5):恭喜抢沙发,给个红包
amisking(金币+1,VIP+0): 11-11 08:40
120V跑25分钟左右。
生命的海洋里,我是蓝色的一滴
2楼2009-10-30 20:45:07
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Entrez1110

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+4,VIP+0): 11-11 08:40
Marker部分条带看不清。
如果跑在最前面的条带看不清,是胶的问题。
如果是靠近加样孔地方,找不到相应的条带,可能是条带还没有跑开,适当加长时间。

电流时间不是死规定的,根据你的目的条带大小来确定,loading buffer有指示,即使拿出来拍照后,也可以放回去继续跑。
3楼2009-10-30 20:58:27
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heroxuning

木虫 (正式写手)


amisking(金币+1,VIP+0): 11-11 08:40
120v ,一般二十分钟 具体看目的条带大小了 楼上正解
4楼2009-10-31 11:32:29
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gaoyuling

铜虫 (正式写手)

这个应该没有一个标准的数值,看自己的条件和物质的性能了!
5楼2009-11-11 08:08:38
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zxx0914

金虫 (小有名气)

100V  25min
6楼2009-11-11 08:23:31
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rosalie161

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
120V半个小时左右,在蓝带过了2/3就差不多了!
Rosalei.....
7楼2009-11-11 08:39:57
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水过无恒

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1%用来跑1Kbp以下的带,1Kbp以上正常的通常是0.7%,比如楼主抽的质粒啊之类的。

loading buffer最下面一条带大约是(0.7%的胶为标准)500bp,最上面的大约是4500bp

如果你抽的是总DNA,那loading buffer最上面一条带跑出去的,在跑20分钟也无所谓

所以不能看电压的电泳时间,要看你的检测质粒大小等因素
8楼2009-11-11 08:41:29
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陈思容

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
0.8%的琼脂糖,100V,25min
9楼2009-11-11 13:05:25
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~明晓溪~

木虫 (正式写手)

我一般跑十五分钟左右就可以了,也要看物质和条件了,估计大概都在二十分钟左右
10楼2009-11-11 15:51:13
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