由多种氨基酸组成的就是复合氨基酸了呗~~

你要分析什么呢？氨基酸种类还是啥？？

复合氨基酸主要成份:含甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸等18种氨基酸 猪血是一种高蛋白的动物食品，新鲜猪血中含蛋白质19%、脂肪0.4%、矿物质0.5%，大大高于猪肉和鸡蛋的几十倍。此外还含有人体必需的铁、铜、锌等多种微量元素，属有超级液体肉”之称。以猪血为原料生产的复合氨基酸，游离l型氨基酸含量高，其总含量占82%以上，游离必需氨基酸总量占氨基酸总量50%以上。
　　氨基酸是人体生命运动中所必须的基本物质，其生理作用是促进蛋白质合成、胶原蛋白、生长激素分泌，保护肝脏功能，预防酒后肝功能损害，美容美肤，消除疲劳，增强食欲，提高机体的免疫能力，促进病后、产后康复，调节内分泌，增加大脑功能，缓解疲劳。

n 大多数氨基酸不含有特征发色基团。因此，氨基酸的分析依赖于衍生化反应。

n 对衍生化试剂的要求是反应快，并且产物与试剂本身的光谱性质有明显的差异。

n 常用的衍生化试剂有2，4-二硝基氟苯、荧光胺及邻苯二甲醛等。

n根据产物性质的不同，衍生化试剂可分为显色剂及荧光衍生化试剂两大类

一、斑点显色分析法

n 茚三酮是氨基酸的斑点显色分析中非常简单的衍生化试剂。

n 它可以与一级和二级胺在酸性介质中（pH 3～4）加热反应，反应产生氨、二

   氧化碳和蓝-紫色的络合物。

n一级和二级胺的检测波长分别为570和440 nm。若二者同时存在，一般在500 nm处测

定，灵敏度有所降低。

n另一种常用的显色反应试剂是2，4-二硝基氟苯，它可以与样品中氨基酸及一级和

二级胺反应，生成黄色络合物，检测波长在 420nm。该法测定的是氨基酸的总量。

二、斑点荧光分析法

n荧光胺是用于氨基酸分析的高灵敏荧光衍生化试剂，可用于氨基酸的表面分析，如

薄层色谱。

n邻苯二甲醛（OPA）是用于氨基酸荧光分析的另一种常见的衍生化试剂。

第三节 色谱方法

（一）离子交换色谱法

离子交换色谱的基本原理是基于带电荷的阴阳离子与带相反电荷的离子交换基团的相互作用。其固定相应具有分离效能高、物化性质稳定、柱容量大、分辨率高、能快速保持生物分子活性和构象完好。

n阳离子交换树脂：强酸型磺酸化的聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物。

n阴离子交换树脂：只有在特殊情况下用于强酸性氨基酸的分析。

1、直接检测法

离子交换色谱法用于氨基酸分析时可在200nm处对各种氨基酸进行直接检测，检出限在1～10 pmol之间。

直接检测的缺点（1）选择性差：生物样品中多种内源性成分在200 nm处均有吸收；（2）背景高：HPIC常用的各种溶剂在200 nm处也有吸收。

离子交换色谱-积分脉冲安培法 (HPIC-IPAD)

该方法是基于阴离子交换分离，积分脉冲安培法检测无需将待测氨基酸转变成可被检测的化合物的衍生反应该方法的灵敏度高

2、柱后衍生化法

需要先将氨基酸衍生为具有较强紫外或荧光吸收的衍生物。

n为了提高灵敏度及选择性，一般采用柱后衍生化，再用紫外或荧光法对产物进行检测。

n常用衍生化试剂：茚三酮、邻苯二甲醛、荧光胺。

离子色谱法采用柱后衍生化法的优点

1、几乎不需要样品处理步骤，蛋白质水解产物可以直接进样分析；

2、反应产物与副产物的混合物无需分离；

3、离子色谱柱的稳定性高，因而样品间的重现性好；

4、反应无需完成，产物也可以是多种。只要混合时间及反应产物的比例是一定

   的，则分析的重现性就不会受到影响。

5、对反应产物的稳定性要求低，因为反应及检测几乎是同时进行的。

（二）反相色谱分析法

n反相色谱法是以表面非极性载体为固定 相，而以比固定相极性强的溶剂为流动 相的一种液相色谱分离模式。

n反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏 水基团，基于样品中的不同组分和疏水 基团之间疏水作用的不同而分离。

反相色谱分析法的效率比离子色谱法高

用于氨基酸分析一般采用柱前衍生化。衍生化不仅可以提高氨基酸被检测的信号强度，而且可以提高氨基酸的疏水性，从而可以用反相色谱法进行分离。

（三）柱前衍生气相色谱法

n气相色谱法分析氨基酸具有分离时间短、柱效高、容易和质谱联用等优点。

n氨基酸含有羧基、羟基、氨基和硫基等极性基团，需要先对其衍生化。

衍生化方法有两种

n两步法是先将羧基用短碳链脂肪醇酯化，

然后再用各种酸酐将N-（O、S）基团乙酰

化。

n一步法是用烃基氯甲酰酯在水、醇类和吡

啶介质中将氨基酸一步衍生化生成烃基碳

氧酰烃基酯。

（四）衍生化毛细管电泳法

n毛细管电泳具有微量、灵敏和柱效高的 特点，适合于氨基酸手性分离和复杂样 品中的氨基酸分析。

n用于氨基酸分析的毛细管电泳主要采用 两种分离模式：毛细管区带电泳和胶束 电动毛细管电泳。

n检测方式主要有紫外法和荧光法

n衍生化毛细管电泳法可以进行柱前、柱内和柱后衍生化。

n柱内衍生化要求反应速度快，一般采用串联或 “夹心饼”两种形式，具有试剂和样品用量少的优点。

n柱后衍生化可以避免柱前或柱内衍生化时其他化合物对衍生反应的干扰，缺点是柱后反应装置体积大，会引起色谱峰变宽而降低分离效果。

也有氨基酸分析仪；用这会很方便，