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pUC19和pBR322DNA的区别和用途?

作者 pkmhero
来源: 小木虫 250 5 举报帖子
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请问pUC19和pBR322DNA的区别和用途?
在DNA电泳实验中,当二者断裂成FormI 、Form II及FormIII时,三者之间的间距是否时相似的?

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-4 at 09:27 ] 返回小木虫查看更多

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  • 精华评论
  • shensc727

    帮你顶一下!期待高手的回答!

  • hihoney

    文献中都有人用,区别不是很大。

  • rosalie161

    pBR322质粒载体的结构
    pBR322质粒载体的基因组图谱如下:
    pBR322质粒DNA分子的长度为4363bp,此载体中有两个标记基因,一个是氨苄青霉素抗性基因(Apr),另一个是四环素抗性基因(Tetr)。现在已知pBR322DNA分子共有24种核酸内切限制酶的单一识别位点。其中7种限制酶(从12:00位置按顺时针方向)即EcoRV、NheI、 BamHI、SphI、SalI、XmaIII和NruI的识别位点位于四环素抗性基因内部,另
    外有2 种限制酶即ClaI和HindIII的识别位点是存在于这个基因的启动区内,在这9个限制位点上插入外源DNA都会导致tetr的失活。3种限制酶即 ScaI、PvuI和PstI的识别位点位于氨苄青霉素抗性基因内,在这些位点插入外源DNA则会导致ampr基因的失活。由pBR322质粒载体的结构可知其具有如下优点:(1)具有较小的分子量。经验表明,为了避免在DNA的纯化过程中发生链的断裂,克隆载体的分子大小最好不要超过10Kb。 pBR322质粒这种小分子量的特点,不仅易于自身DNA的纯化,而且可容纳较大的外源DNA片段;(2)具有两种抗菌素抗性基因可供作转化子的选择记号,能指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞以及外源DNA分子是否插入载体分子形成了重组子。标记基因往往可以赋予宿主细胞一种新的表型,这种转化细胞可明显地区别于非转化细胞。当我们把一个DNA片段插入到某一个标记基因内时,该基因就失去了相应的功能。当把这种重组DNA分子转到宿主细胞后,该基因原来赋予的表型也就消失了。要是仍保留了原来表型的转化细胞,细胞内含有的DNA分子一定不是重组子。很显然,既要指示外源DNA是否进入了宿主细胞,又要指示载体DNA分子中是否插入了外源DNA片段,那么这种载体必须至少具有两个标记基因。另外,pBR322质粒载体还具较高的拷贝数,而且经过氯霉素扩增之后,每个细胞中可积累1000~3000个拷贝,这就为重组体DNA的制备提供了极大的方便。


    pUC 18 载体的基本信息

    英文名:pUC 18 vector
    别名:
    CAS号:
    产品名称:pUC 18 载体
    分子结构:
    分子式:
    pUC 18 载体 的详情描述

    性质:

      宿主 建议用Escherichia coli JM109作为转化的受体菌体,其他在F'因子上带有lacZ△M15基因及lacσ的不同菌株也可便用。

      浓度 0.5~1μg/μL。

      pUC18是一种质粒克隆载体,含有pBR322中Pvu Ⅱ/EcoR Ⅰ片段,包括抗氨苄青霉素基因及与M13mp18相同的多克隆位点(multiple cloning sites)。
    。因多克隆位点区在lac基因中,重组pUC18的克隆转化细胞可用蓝/白筛选法筛选出。
    安全性:

  • louyiceng

    帮你顶一下

  • wangqk198738

    你做的质粒连接用的试剂盒里的说明书一般都会,而且很详细。一般他们说的都很准确,不想质粒抽提,质粒PCR一样,他们说的可能不是很准确。

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