| 查看: 840 | 回复: 5 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 pkmhero 的 1 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会 | |||
pkmhero捐助贵宾 (著名写手)
|
[交流]
pUC19和pBR322DNA的区别和用途？
|
||
|
请问pUC19和pBR322DNA的区别和用途？ 在DNA电泳实验中，当二者断裂成FormI 、Form II及FormIII时，三者之间的间距是否时相似的？ [ Last edited by 350784478 on 2009-9-4 at 09:27 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
Bioresource Technology期刊，第一次返修的时候被退回好几次了
已经有6人回复
-
2025冷门绝学什么时候出结果
已经有4人回复
-
真诚求助：手里的省社科项目结项要求主持人一篇中文核心，有什么渠道能发核心吗
已经有8人回复
-
寻求一种能扛住强氧化性腐蚀性的容器密封件
已经有5人回复
-
论文投稿，期刊推荐
已经有6人回复
-
请问哪里可以有青B申请的本子可以借鉴一下。
已经有4人回复
-
孩子确诊有中度注意力缺陷
已经有14人回复
-
请问下大家为什么这个铃木偶联几乎不反应呢
已经有5人回复
-
请问有评职称，把科研教学业绩算分排序的高校吗
已经有5人回复
-
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入
已经有4人回复
2楼2009-09-03 16:02:23
hihoney 
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 6375.7
- 散金: 314
- 红花: 4
- 帖子: 3325
- 在线: 445.1小时
- 虫号: 349053
- 注册: 2007-04-19
- 性别: GG
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
3楼2009-09-03 16:05:54
rosalie161
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1101.9
- 帖子: 438
- 在线: 53.6小时
- 虫号: 482150
- 注册: 2007-12-20
- 性别: GG
- 专业: 植物化学保护
★
pkmhero(金币+1):谢谢参与
pkmhero(金币+1):谢谢参与
|
pBR322质粒载体的结构 pBR322质粒载体的基因组图谱如下： pBR322质粒DNA分子的长度为4363bp，此载体中有两个标记基因，一个是氨苄青霉素抗性基因（Apr），另一个是四环素抗性基因（Tetr）。现在已知pBR322DNA分子共有24种核酸内切限制酶的单一识别位点。其中7种限制酶（从12：00位置按顺时针方向）即EcoRV、NheI、 BamHI、SphI、SalI、XmaIII和NruI的识别位点位于四环素抗性基因内部，另 外有2 种限制酶即ClaI和HindIII的识别位点是存在于这个基因的启动区内，在这9个限制位点上插入外源DNA都会导致tetr的失活。3种限制酶即 ScaI、PvuI和PstI的识别位点位于氨苄青霉素抗性基因内，在这些位点插入外源DNA则会导致ampr基因的失活。由pBR322质粒载体的结构可知其具有如下优点：（1）具有较小的分子量。经验表明，为了避免在DNA的纯化过程中发生链的断裂，克隆载体的分子大小最好不要超过10Kb。 pBR322质粒这种小分子量的特点，不仅易于自身DNA的纯化，而且可容纳较大的外源DNA片段；（2）具有两种抗菌素抗性基因可供作转化子的选择记号，能指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞以及外源DNA分子是否插入载体分子形成了重组子。标记基因往往可以赋予宿主细胞一种新的表型，这种转化细胞可明显地区别于非转化细胞。当我们把一个DNA片段插入到某一个标记基因内时，该基因就失去了相应的功能。当把这种重组DNA分子转到宿主细胞后，该基因原来赋予的表型也就消失了。要是仍保留了原来表型的转化细胞，细胞内含有的DNA分子一定不是重组子。很显然，既要指示外源DNA是否进入了宿主细胞，又要指示载体DNA分子中是否插入了外源DNA片段，那么这种载体必须至少具有两个标记基因。另外，pBR322质粒载体还具较高的拷贝数，而且经过氯霉素扩增之后，每个细胞中可积累1000~3000个拷贝，这就为重组体DNA的制备提供了极大的方便。 pUC 18 载体的基本信息 英文名：pUC 18 vector 别名： CAS号： 产品名称：pUC 18 载体 分子结构： 分子式： pUC 18 载体 的详情描述 性质： 宿主 建议用Escherichia coli JM109作为转化的受体菌体，其他在F'因子上带有lacZ△M15基因及lacσ的不同菌株也可便用。 浓度 0.5～1μg／μL。 pUC18是一种质粒克隆载体，含有pBR322中Pvu Ⅱ／EcoR Ⅰ片段，包括抗氨苄青霉素基因及与M13mp18相同的多克隆位点（multiple cloning sites）。 。因多克隆位点区在lac基因中，重组pUC18的克隆转化细胞可用蓝／白筛选法筛选出。 安全性： |
4楼2009-09-03 16:26:18
louyiceng
荣誉版主 (知名作家)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 贵宾: 10.921
- 金币: 19042.7
- 红花: 8
- 沙发: 1
- 帖子: 6329
- 在线: 337.6小时
- 虫号: 34457
- 注册: 2004-01-27
- 性别: GG
- 专业: 有机分子功能材料化学
5楼2010-03-07 11:34:43
wangqk198738
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1079.6
- 红花: 2
- 帖子: 420
- 在线: 19.8小时
- 虫号: 531615
- 注册: 2008-03-23
- 专业: 生物化学与分子生物学
6楼2010-03-07 22:15:33