【讨论】色谱分析中同一物质出现双峰的原因及处理
色谱双峰指的是明是一种物质，但在色谱图中出现双峰，而表明含二种物质。我将这种情况分为四种原因。
1 、色谱柱
如果你分析样品时发现每个色谱峰都双峰出现，而且出峰越快，双峰的可能性会减少，再采用单一纯物质时也出现双峰，则可以肯定是色谱柱出问题：即柱头受损或柱头固定相变脏或流失（如果有保护柱的话换一根保护柱就可以解决了）。
如果进样量少，原来色谱柱正常，色谱峰的形状多为一大峰带一小峰，不一定拖尾，这一般应是柱头受堵，将色谱柱反过来接，用流动相冲洗或酸洗或其它溶剂，将堵在柱头的残留物冲掉，再反过来，一般情况下就行了。当然不反冲，正冲有时也会正常的。如果峰拖尾，双峰强弱相差不大，柱头固定相变脏或流失可能性更大，这是可以将进样那头拧开，将微孔滤片超声，柱头刮去一部分填料，重新填上新填料拧紧，不过这种活，需要一定技术，同时不能老干那种事，否则用不了几次，色谱柱就会应柱效很低而报废。
2 、溶剂极性及进样量
许多HPLC分析者对此可能不以为然，一般的HPLC的书籍和文献都不会提到这方面的内容，而这确是双峰产生的一个很重要的原因。目前HPLC分析多为反相色谱，流动相多为甲醇、乙腈、水，加各种添加剂以改善分离性能。样品一般用与流动相相溶的溶剂溶解。最佳的溶解方法是用流动相溶解，但是很多情况是不一致的。当用溶剂极性强度大的试剂，如纯甲醇、纯乙腈，纯乙醇，而分析体系中以水为主，样品进样量大，如定量管为20ul，此条件下完全可以肯定，单一的纯物质出双峰，第二峰比第一峰小（每次都不太一样），且拖尾，保留时间会提前(相对进样量少而言)，将进样量减少一半以上，峰型将变为正常。这是样品的溶剂与流动相极性相差太大，而流动相来不及将其稀释达到平衡造成的。上面提到进样量造成双峰的一个原因，另一个原因是，进样量不一定大，但绝对量很大，色谱图上的双峰紧靠在一起，基本上齐高，不拖尾（如果出峰很快，也可能是色谱柱问题）。将样品稀释再进样就可以了，这是由于进样量过大，色谱柱过载造成的。
3 、样品的特性
有些样品由于其化学结构的特点，存在互变异构现象，而这种互变异构体无法分开，
原文：http://www.antpedia.com/viewspace-47963
[ Last edited by flyingwings on 2009-8-29 at 10:39 ]
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主要还是流动相的问题，更改下比例吧
总结的还是很全面的，收藏了。
有些物质分混合型 和单独的 混合型就可以出俩峰呀
不过 谢谢 楼主资料
同种分子式结构可能不同 没有绝对纯的标样 含手性的也很正常�
总结的很好!