求助:关于紫外测定最佳波长的确定
请教各位:本人最近在建立一个植物总黄酮含量测定的方法,以芦丁为标准品(用NaNO2-Al(N03)3-NaOH显色法),但是在200nm-600nm进行紫外扫描时发现,我的样品最大吸收峰和芦丁标准品最大吸收峰相距很远.....所以现在不知道应该怎样选择最终测定波长,请知道的前辈指点指点,不胜感激!(是不是这种情况选择芦丁作为标准品都是不合适的??)紧急!!!
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请教各位:本人最近在建立一个植物总黄酮含量测定的方法,以芦丁为标准品(用NaNO2-Al(N03)3-NaOH显色法),但是在200nm-600nm进行紫外扫描时发现,我的样品最大吸收峰和芦丁标准品最大吸收峰相距很远.....所以现在不知道应该怎样选择最终测定波长,请知道的前辈指点指点,不胜感激!(是不是这种情况选择芦丁作为标准品都是不合适的??)紧急!!!
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芦丁用这个方法测含量不稳定
我论文也用的这个方法,被质疑了的
专家建议用HPLC法
选芦丁为标准品,是可以的
黄酮有两个吸收峰,分别是苯甲酰基(220-280nm)和桂皮酰基(300-400nm)的吸收。
确定黄酮的紫外检测波长,不一定要选最大吸收(一般220-280nm)。遇到最大吸收位置有干扰等情况,也可以用300多nm的峰,当然,前提是对照(芦丁)和样品的300多nm峰位置一致,
用此显色法是有条件的,你的药品是不是有适合这个显色法的结构?最好先确定一下
紫外 本来就是不太稳定的,用HPLC吧
样品存在其他成分干扰,紫外测中药成分难度比较大
用NaNO2-Al(N03)3-NaOH显色法测芦丁要求操作迅速,否则会造成结果偏低,UV测定黄酮类成分一般用芦丁,但是这个方法比较粗放,如果有确定的成分,可以用HPLC