当前位置: 首页 > 生物科学 >【交流】晒晒蛋白胶(PAGE)染色液和脱色液的配方

【交流】晒晒蛋白胶(PAGE)染色液和脱色液的配方

作者 houjinglhy
来源: 小木虫 650 13 举报帖子
+关注

发现蛋白胶染色液和脱色液的配方有很多。
不知道各位用的是什么样子,还有胶的处理方法
大家拿出来讨论下。
首先,我把我们实验室的记下来。

染色液:
考马斯亮蓝R250 1.2g/L ; 甲醇:水:乙酸 (5:4:1 或 4.5:4.5:1)
脱色液:
除不加考马斯亮蓝R250 其他一样。

染色:微波高火15-20S 再染1 h  或 常温 3h-过夜
         回收染料适当延长时间
脱色:脱到能看清 返回小木虫查看更多

今日热帖
  • 精华评论
  • wql1828

    我们用的是

    染色液:
    考马斯亮蓝R250 ;   乙醇:水:乙酸 脱色液:
    除不加考马斯亮蓝R250 其他一样。

    染色: 常温 2h     

    脱色:脱一整夜

  • houjinglhy

    引用回帖:
    Originally posted by wql1828 at 2009-7-13 15:59:
    我们用的是

    染色液:
    考马斯亮蓝R250 ;   乙醇:水:乙酸 脱色液:
    除不加考马斯亮蓝R250 其他一样。

    染色: 常温 2h     

    脱色:脱一整夜

    染色液比例呢 嘿嘿

  • jlc0225

    据《蛋白质技术手册》2001,科学出版社
    考马斯亮蓝染液,1L:
    R-250 1.0g
    甲醇 450ml
    蒸馏水 450ml
    冰醋酸 100ml
    脱色液 1L:
    甲醇 100ml
    冰醋酸 100ml
    蒸馏水 800ml
    染色常温 2h
    90℃ 30min
    脱色常温过夜
    90℃ 2h

  • susizheng

    引用回帖:
    Originally posted by jlc0225 at 2009-7-13 16:17:
    据《蛋白质技术手册》2001,科学出版社
    考马斯亮蓝染液,1L:
    R-250 1.0g
    甲醇 450ml
    蒸馏水 450ml
    冰醋酸 100ml
    脱色液 1L:
    甲醇 100ml
    冰醋酸 100ml
    蒸馏水 800ml
    染色常温 2h
    90℃ 30min
    脱色常温 ...

    这个教科书上的配方(脱色液)在实际操作中肯定是不行的,甲醇和冰醋酸浓度太低会导致根本脱不了色,或者脱色太过漫长,

    配方
    染色液:考马斯亮蓝R-250 2.5g/L 甲醇:水:冰乙酸=4.5:4.5:1
    脱色液:同上,不加考马斯亮蓝
    染色:常温3h,
    脱色:半小时换一次脱色液,3次后过夜脱色。
    由于甲醇和冰乙酸浓度较高,胶会出现缩小,拍照时以卷曲,故拍照前用稀释后的脱色液(稀释30倍)振荡1h后拍照

  • houjinglhy

    引用回帖:
    Originally posted by susizheng at 2009-7-13 17:18:

    这个教科书上的配方(脱色液)在实际操作中肯定是不行的,甲醇和冰醋酸浓度太低会导致根本脱不了色,或者脱色太过漫长,

    配方
    染色液:考马斯亮蓝R-250 2.5g/L 甲醇:水:冰乙酸=4.5:4.5:1
    脱色液:同上 ...

    刚脱色的胶确实很皱 没法拍照
    脱色后的胶一般在水里泡上一天后才能拍照
    泡水后胶都会变大很多

  • jlc0225

    引用回帖:
    Originally posted by susizheng at 2009-7-13 17:18:

    这个教科书上的配方(脱色液)在实际操作中肯定是不行的,甲醇和冰醋酸浓度太低会导致根本脱不了色,或者脱色太过漫长,

    配方
    染色液:考马斯亮蓝R-250 2.5g/L 甲醇:水:冰乙酸=4.5:4.5:1
    脱色液:同上 ...

    但是你的方法也需要过夜啊。我的方法脱色效果也很好,而且省试剂。

  • clbb1030

    我用的脱色液是水:365ml,甲醇:35ml,冰醋酸100ml。

猜你喜欢
下载小木虫APP
与700万科研达人随时交流
  • 二维码
  • IOS
  • 安卓