请教总氮测定的试剂问题
这两天在弄总氮的标准曲线,换了国药优级纯的硝酸钾,国药的分析纯的过硫酸钾,蒸馏的无氨水,消解出来空白吸光度在220nm处还有0.561,有超过吸光度1的,觉得肯定有问题了,所以请教做过总氮项目的高手,传授点经验,帮我找找原因。还有两个问题问下:
1、在275nm处吸光度是不是都一样?
2、你们平时用的过硫酸钾一般是哪个厂家的?
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这两天在弄总氮的标准曲线,换了国药优级纯的硝酸钾,国药的分析纯的过硫酸钾,蒸馏的无氨水,消解出来空白吸光度在220nm处还有0.561,有超过吸光度1的,觉得肯定有问题了,所以请教做过总氮项目的高手,传授点经验,帮我找找原因。还有两个问题问下:
1、在275nm处吸光度是不是都一样?
2、你们平时用的过硫酸钾一般是哪个厂家的?
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楼上兄弟,先谢过了
请问提纯后效果和进口的还有多大差距?
呵呵,也有不小的差距啊
一般做不到0.03的空白值
不过也可以做到0.1以下
在做曲线的时候扣除一下就可以了
是不是有有机物呀
是不是有有机物呀,试剂质量差业不会有这么高的空白呀,还是你的比色皿不干净呀
我去年半年一直在处理这个问题。换了不下10种药品,最后经过检验上海爱建(德固赛)的分析纯的过硫酸钾可以满足要求。国药的也买了。不行的。至于水,普通的去离子水就可以的,没有太高的要求;至于7楼说的提纯,不但额外增加不少负担,而且经过我的实验,这个过程极其繁琐,而且药品损失量比较大,一次提纯也不见得可以达到要求。另外60摄氏度以上药品就开始分解,所以加热提高溶解度的水平也有限;所以最最最直接的就是买合格的药品;我现在是爱建的+优级纯盐酸和优级纯氢氧化钠。做出来的曲线非常漂亮。空白<0.03,r2>0.999;另外在275nm的吸光度基本上不变,在0.006~0.009之间,所以剪掉2倍的基本上对总的校正吸光度影响不大,而且所有的点都减,所以只是坐标轴上一个截距的改变;如果要求不是很高的话可以不做;,
今天我用高纯水制作标准曲线做到
y = 0.0082x + 0.5402
R2 = 0.9977
严重错误,a值远大于0.005,
明天用重结晶的过硫酸钾再试试,真是晕了。
还有想请教各位,昨天遇到一个问题,标线的最后两个样在275nm处吸光度是负值,各位有没有遇到过?
我们实验室也快因为试剂问题忙晕了,尤其是过硫酸钾,好多厂家的都不行。准备买进口的,请问各位进口的那个牌子好一点呢?
关于这个问题,大多数人都碰到过,当时我们也做了好多的实验,结果发现是过硫酸钾的批次有关系,有时候整批的过硫酸钾都不行,结果我们换了批次的过硫酸钾以后就好多了,其实还有一个办法就是先把过硫酸钾放在水里面,加点氢氧化钠如果有氨味就不要用,没有的你再试一下,我们就是这么做的,效果还好的,再就是测定总氮一定用超纯水,就是蒸馏水在经过膜过滤过的,275nm的吸光度一般比较小