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降落pcr的程序不是固定的，是根据实验的需要设定的吧，你还是多参考一下相关的文章

引用回帖:

Originally posted by sutao1979 at 2009-3-8 18:29:
降落pcr的程序不是固定的，是根据实验的需要设定的吧，你还是多参考一下相关的文章

同样楼上，其实在普通PCR仪上设置降落pcr的程序很简单，只要常规的PCR程序会设计，这就好办，首先根据引物上的Tm值设计第一轮的程序，当然，要选引物所给Tm值低的那个，然后在循环4轮，每轮降1度，在PCR仪上多摸索几次，最后就是设计普通PCR的程序了，比如：
1、95度   5分钟
2、94度    50秒
3、60度   45秒       +（这个加号应该在PCR仪上显示）
4、72度   2分钟     2      5

5、94度    50秒
6、55度   45秒
7、72度   2分钟     5      25
8、72度  10分钟
9、16度   X分钟

[ Last edited by your2007 on 2009-3-8 at 19:31 ]

大家好，我最近用到了touchdown PCR程序，一开始不会设置，后来在园子里面搜也没有搜到，昨天折腾了一整天，终于把Biometra PCR仪以及GeneAmp PCR system 2700型号 PCR 仪的touchdown程序都搞明白了。鉴于大家一般用的都是Biometra PCR，我就把Biometra PCR仪的touchdown程序设置写到这里，供大家参考使用。(我以退火温度从65度降到55度为例，每个循环降0.5度，共需20个循环，然后再继续55度退火的5个循环，战友们根据自己情况再调整）
（1）首先是开机打开主页面-----按C键（programme）进入到---列表页面-----通过方向键选择一个subdirect-----按enter进入-----输入你的programme no 和name----再enter----设置lid temp:99度和preheating: on----继续按enter进入---输入
1：94度 5min
2：94度 1min
3：65度 1min（然后连按向右的方向键3下，进入到另一个界面，在
标闪烁处（也就是3的后面）输入-0.5（其上方为dt），
其他的不管，然后，再连续按enter键回到编程的主页
面，此时（65 度 1min 后面会显示一个加号）

4：72度 1min 2 19（Biometra PCR 本身加一个反应即20个循环）
5：94度 1min
6： 55度 1min
7： 72度 1min 5 4（Biometra PCR 本身加一个反应即5个循环）
8：72度 10min
9 ：4度 10h
好了，一个touchdown程序就设好了，本来想照了图片对应说，但是借别人的相机，界面照得不清楚，只好这样写出来了，也不知道说清楚了没有。

最后，祝大家试验顺利，

每个循环降0.5度？
不需要这么精细吧，我做实验一般是隔2个循环温度降2度，最后在55度做25个循环，效果很好

4楼太牛了，正好我也要做这个，谢谢